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(二)核酸的复性DNA热变性后的复性,常常称为退火。变性的DNA或RNA在去除变性因素并处于适当的条件下,又可重新结合成为双螺旋结构这一过程称为复性。1.概念彼此分离的双链2.复性过程两种情况第63页,共89页,星期日,2025年,2月5日(1)两条完全分开的单链通过随机碰撞形成互补短片段的双螺旋。(2)尚未配对的碱基很快地“对齐”。迅速形成双链直至双螺旋结构。第64页,共89页,星期日,2025年,2月5日复性后DNA分子性质一系列的理化性质随即恢复d.生物活性部分恢复a.260nm处的紫外吸收值下降b.粘度上升c.浮力、密度降低(减色效应)第65页,共89页,星期日,2025年,2月5日(三)核酸分子杂交在一定条件下(适宜的温度、pH及离子强度),可按碱基互补原则复性形成双链,此过程称为核酸分子杂交。1.概念具有一定同源性的两条核酸单链,变性复性第66页,共89页,星期日,2025年,2月5日不完全同源核酸单链分子杂交突环第67页,共89页,星期日,2025年,2月5日2.可发生杂交的核酸分子(1)两条同源的DNA链(2)两条同源的RNA链(3)一条DNA链一条RNA链3.核酸杂交的应用(1)测定核酸分子碱基组成(2)检测某些因基因突变引起的疾病第68页,共89页,星期日,2025年,2月5日(3)离子键5.维持DNA双螺旋稳定的作用力(1)互补碱基间的氢键(2)使碱基平面堆积的平面间范德华力,又称碱基堆积力第31页,共89页,星期日,2025年,2月5日二、DNA结构的多样性A-DNA:右手螺旋B-DNA:Watson-Crick模型,右手螺旋生理条件下DNA最稳定的结构形式Z-DNA:左手螺旋第32页,共89页,星期日,2025年,2月5日DNA的三级结构原核生物真核生物没有典型的细胞核结构,真核生物DNA的三级结构是由DNA分子与组蛋白(histine)和非组蛋白(nonhistineprotein,NHP)结合组成。被认为是原核生物DNA的三级结构被认为是真核生物DNA的三级结构超螺旋结构核小体结构第33页,共89页,星期日,2025年,2月5日DNA超螺旋结构第34页,共89页,星期日,2025年,2月5日H2A、H2B、H3和H4各两分子组成组蛋白八聚体,构成核心组蛋白双螺旋DNA以左手超螺旋的方式绕核心颗粒1.75圈,缠绕在核心组蛋白表面,构成核心颗粒核心颗粒和连接区DNA及附着在连接区DNA上的组蛋白H1构成核小体第35页,共89页,星期日,2025年,2月5日一个个核小体连接成串珠状结构染色单体折叠折叠第36页,共89页,星期日,2025年,2月5日第三节RNA的结构和功能一、RNA的类型1.核蛋白体RNA(ribosomalRNA,rRNA)3.转运RNA(transferRNA,tRNA)2.信使RNA(messengerRNA,mRNA)4.不均一核RNA(HnRNA)二、RNA的结构与功能5.小核RNA(SnRNA)第37页,共89页,星期日,2025年,2月5日mRNA的结构与功能一、mRNA的结构特点(1)3’末端有多聚腺嘌呤的结构(polyA)(2)5’末端具有帽子结构(m7GpppNm)(3)一种mRNA只含有一条多肽链的信息※由HnRNA经过剪接而成※半衰期最短,几分钟到数小时第38页,共89页,星期日,2025年,2月5日二、mRNA的功能蛋白质合成的直接模板把核内DNA的碱基顺序(遗传信息),按照碱基互补的原则,抄袭并转送至胞质,在蛋白质合成中用以翻译成蛋白质中氨基酸的排列顺序。第39页,共89页,星期日,2025年,2月5日tRNA的结构与功能1.分子量最小一类RNA,占RNA总量10-25%2.分子中含有10%-20%的稀有碱基一、tRNA的结构特点如假尿嘧啶(ψ),二氢尿嘧啶(DHU),甲基化碱基(mG,mA)等3.3’末端有CCA-OH,是携带氨基酸的部位第40页,共89页,星期日,2025年,2月5日4.具有识别密码子功能的反密码子5.二级结构为三叶草形,有三个环状结构(DHU环、Tψ环、反密码环)三级结构为“倒L”形二、tRNA的功能在蛋白质的合成过程中作为各种氨基酸的载体并将其转呈给mRNA第41页,共89页,星期
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