生化工程第七章固定化酶和细胞.pptVIP

在工程上要求，在最短的操作时间内，用最少量的（固定化）酶，达到最大的产物生成量、最高的底物转化率，以使生产成本最低。(这些条件称之为反应器效率。)下面比较CSTR和PFR的反应器效率第30页，共45页，星期日，2025年，2月5日（3）PFR和CSTR反应器的生产时间比较为了方便比较，把操作方程改写为：……CSTR……PFR第31页，共45页，星期日，2025年，2月5日PFR和CSTR的生产时间比较x应在80﹪以上。达同样的转化率，F值差别很大。而且越小，差别越显著。结论：PFR的停留时间小于CSTR的停留时间第32页，共45页，星期日，2025年，2月5日第1页，共45页，星期日，2025年，2月5日1、酶分子构相的改变和载体屏障效应载体的存在引起屏蔽效应，使酶分子的活性基团不易与底物或效应物接触，从而影响固定化酶的活性。第2页，共45页，星期日，2025年，2月5日2、微环境效应—分配效应固定化酶处于主体溶液中，形成非均相反应系统。在固定化酶附近的环境称为微环境，而主体溶液则称为大环境。由于载体和底物的疏水性、亲水性以及静电作用，使微环境与大环境有不同的性质，从而形成底物和各种效应物的不均匀分布，这种效应称为分配效应。第3页，共45页，星期日，2025年，2月5日3、扩散阻力用固定化酶进行反应时，底物必须从主体溶液传递到固定化酶内部的催化部位。反应后，产物又沿着相反路线从酶的催化部位传递到主体溶液。这些传递过程包括被动分子扩散和对流扩散，传递过程中存在着一个扩散速率限制问题。这种扩散限制效应在扩散效率很低时，而酶的催化活力又相当高时特别显著。第4页，共45页，星期日，2025年，2月5日底物从反应液移向载体表面（外扩散）底物从载体表面移向酶活性中心（内扩散）酶反应产物由反应位点移向载体表面（内扩散）产物移到反应液中（外扩散）总的反应速度取决于最慢的步骤3、扩散阻力第5页，共45页，星期日，2025年，2月5日3、扩散阻力限速步骤有可能是外扩散、内扩散或酶反应。存在的扩散效应会使固定化酶、固定化细胞的动力学行为偏离其液态下的动力学行为。第6页，共45页，星期日，2025年，2月5日4、外扩散限制的分析及对酶反应动力学的影响外扩散发生在固定化酶周围的处于停滞状态的液膜层。由于存在外扩散阻力，底物将在固定化酶周围形成浓度梯度。滞流层的厚度在一定限度内，它受固定化酶界面周围溶液的相对速度的影响。外扩散限制随反应体系搅拌速度的增加而减少。第7页，共45页，星期日，2025年，2月5日4、外扩散限制的分析及对酶反应动力学的影响存在外扩散限制的固定化酶反应动力学方程为：V=Vm=K·E，E为固定化酶浓度Km(app)：表观米氏常数在操作上使流体的湍动程度大，能改变或消除外扩散的影响。Vm·SS+Km(app)第8页，共45页，星期日，2025年，2月5日5、内扩散限制的分析以及对酶反应动力学的影响内扩散阻力发生在多孔性固定化酶载体的内部，它是底物传递到固定化酶内部时的一种扩散限制效应。第9页，共45页，星期日，2025年，2月5日5、内扩散限制的分析以及对酶反应动力学的影响在微环境内底物的消耗和产物的积累程度，也常和这些物质的分子量大小有关。第10页，共45页，星期日，2025年，2月5日5、内扩散限制的分析以及对酶反应动力学的影响大分子物质在多孔介质中扩散时，其扩散系数较小，以致在微环境中形成严重的底物枯竭和产物的大量积累，这会严重影响酶促反应速度。第11页，共45页，星期日，2025年，2月5日5、内扩散限制的分析以及对酶反应动力学的影响内扩散限制对酶促反应动力学的影响，比外扩散更为突出，因为外扩散限制可以通过搅拌来基本消除，而内扩散限制无法消除。在固定化酶、固定化细胞的内部，不存在流体流动，其传质完全依赖于分子被动扩散作用。定义η为有效系数：η==V有V无有微孔内扩散效应下的反应速度无微孔内扩散效应的反应速度第12页，共45页，星期日，2025年，2月5日5、内扩散限制的分析以及对酶反应动力学的影响固定化酶、细胞的反应速度：V=ηVm·Sa/(Km+Sa)Sa：载体表面底物浓度η是与内扩散系数Φ有关的因子Φ=R√Vm/Km·Deη∝1/ΦR为固定化颗粒半径第13页，共45页，星期日，2025年，2月5日8.4均相酶反应器1、影响均相酶反应速度的因素，通常有下列三