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1比色法与分光光度法
2主要内容第一节基本原理 70第二节目视比色法 73第三节分光光度法 74第四节比色条件的选择 80
3比色法与分光光度法1.光分析法:根据辐射作用于待侧物质后产生的辐射信号或所引起变化进行检测的分析方法。三个主要过程:①辐射源提供能量②辐射与被测物质间相互作用;③产生被检测的信号。电磁辐射的电磁波:γ射线、x光、紫外光、可见光、红外光、微波、无线电波等。
4光谱分析法或光谱法光谱法定义:在光(或能量)作用下,通过测定物质产生(发射、吸收或散射)光的波长和强度来进行定性、定量分析的方法。内部能级变化.分类:按作用物分:分子光谱分析、原子光谱分析按能级跃迁方向:吸收光谱分析、发射光谱分析按波长不同分:红外、可见光、紫外光谱法等
5光谱分析法或光谱法紫外-可见吸收光谱法根据溶液中物质的分子对紫外和可见光谱区辐射能的吸收来研究物质的组成和结构的方法。包括比色分析和紫外-可见分光光度法。机理:不同物质具有不同的分子结构,对不同波长的光会产生选择性吸收,因而具有不同的吸收光谱。
6光谱分析法或光谱法*无机化合物和有机化合物吸收光谱的本质上是相同的,都是外层电子跃迁的结果,但二者在电子跃迁类型上有一定区别。*有机化合物吸收光,σ、Π和n电子跃迁到高能态。各种跃迁所需要的能量或吸收波长与有机化合物的基团、结构有密切关系,根据此原理进行有机化合物的定性和结构分析。*无机络合物吸收带主要是由电荷转移跃迁和配位场跃迁而产生的。
7比色法与分光光度法电磁波特点:作为横向电磁波在空间传播,在真空中传播速度都等于光速,即:λν=C式中λ—波长;ν—频率;C—光在真空中的传播速度,约等于3×108m/s。波粒二象性:波动性和微粒性。波动性:折射、衍射、偏振和干涉等现象。粒子性:光电效应,光是由光子(光量子)所组成,光子具有能量hv,具有动量hv/c。
8比色法与分光光度法光子的能量E与波长λ关系:E=hv=hc/λ光子的动量P与波长λ的关系为:P=hv/c=h/λ式中E为光子的能量;P为光子动量;h为普朗克常数,6.626x10-34J。
9比色法与分光光度法无论物质有无颜色,当光线通过其溶液时,它会有选择地吸收一定波长的光。溶液对特定波长的光的吸收程度与该溶液的浓度有关,溶液的浓度越大,对光的吸收程度也就越大。因此可以根据溶液对光的吸收程度测定溶液的浓度,进而测定被测组分的含量。分光光度法:这种基于溶液对光吸收的大小来测定被测组分的含量的分析方法,称为吸光光度法。
10比色法与分光光度法比色法:利用物质本身具有的颜色或某些待测组分与一些试剂作用生成有色物质,比较溶液颜色深浅的方法来确定溶液中有色物质的含量分类:目视比色法与光电比色法两种。随着测量仪器的改进,分光光度计研制成功,又出现了分光光度法。分光光度法:紫外(UV)、可见(VIS)和红外(IR)等三种。
11比色法与分光光度法可见分光光度计
12比色法与分光光度法紫外-可见分光光度计
13比色法与分光光度法红外测油仪(中红外扫描)
14比色法与分光光度法傅里叶红外光谱仪
15比色法与分光光度法间断分析仪:自动进样、自动加试剂、自动比色分析、是自动出结果(比色机器人)
16比色法与分光光度法应用:比色分析的相对误差通常为5%~20%,分光光度法为2%~5%。其准确度不如重量分析法和滴定分析法。但重量分析法和滴定分析法仅适用于常量组分的分析,对于微量成分的分析,重量分析法和滴定分析法就不适用了,只能采用比色法或分光光度法。
17比色法与分光光度法比色分析法和分光光度法的最大特点:灵敏度高、操作简便、快速,已成为化验分析最基本的分析方法之一,是应用最普遍的组分分析法。重要性:车间化验室、中心实验室、分析测试中心,都经常地使用比色法或分光光度法。因此,化验人员都必须较深入地了解和掌握这一方法。
18第一节基本原理一、溶液颜色与光吸收的关系日常的白光(如日光、白炽灯光等),实际上是波长400~760nm连续光谱的混合光,它是由红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等色光按一定的强度比例混合而成。这段波长范围的光是人们视觉可觉查到的,所以称为可见光。当波长短于400nm时称为紫外光,长于760nm的光称为红外光,它们都是人们视觉觉查不到的光。紫外400-760红外
19第一节基本原理可见光波长
紫外--可见光在电磁波谱中的位置高能辐射区γ射线能量最高,来源于核能级跃迁χ射线来自内层电子能级的跃迁光学光谱区紫外光来自原子和分子外层电子能级的跃迁
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