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TotalDNAextractionfromeukaryotictissue动物组织DNA的提取讲解人：蔡婷芳
实验目的了解动物DNA的成分掌握DNA提取的原理和操作过程
2纯化后不应存在对酶有抑制作用的物质3排除有机溶剂和金属离子的污染1保证DNA结构的完整性5排除其他核酸分子的污染4蛋白质、多糖、酚类等降低到最低程度DNA提取原则
10.14mol/LNaCl1mol/LNaCl溶液2015mol/L柠檬酸钠溶液5仪器：电子天平玻璃棒离心管离心机吸量管试管研钵495%乙醇3氯仿-异戊醇实验试剂和仪器
实验原理动物组织细胞中的核糖核酸(RNA)与脱氧核糖核酸(DNA)大部分与蛋白质结合形成核蛋白。RNA核蛋白和DNA核蛋白在不同浓度氯化钠溶液中的溶解度有显著区别。DNA核蛋白在0.14mol/L氯化钠中溶解度低，但在1–2mol/L氯化钠中溶解度高；RNA核蛋白在0.14mol/L氯化钠中仍有相当大的溶解度。所以调节氯化钠浓度，可使RNA核蛋白和DNA核蛋白分步提取。
氯仿-异戊醇溶液可以使核蛋白变性沉淀，将核酸物质萃取出来；再向萃取液中加入适量乙醇，可使DNA析出。氯仿异戊醇抽提和乙醇沉淀方法在DNA纯化研究中非常常用，氯仿-异戊醇抽提的原理是，氯仿可使蛋白质变性并加速有机相与液相分层；异戊醇有助于消除抽提过程中产生的气泡。而DNA不溶于乙醇等有机溶剂，因此可以通过乙醇沉淀来纯化和浓缩DNA。
01首先是机械法破细胞抽提；然后去除蛋白质，糖类等细胞内杂质污染；最后纯化出ＤＮＡ。0203所以动物细胞中DNA提取一般有以下几步:
取新鲜兔子肝组织3g，加入0.14mol/LNaCl，0.015mol/L柠檬酸钠溶液6mL，在研钵中加入少量石英砂仔细研磨成匀浆；将匀浆倒入离心管，4000rpm，15min，弃上清；沉淀中加入15mL1mol/LNaCl，混匀，搅拌数分钟，4000rpm，15min，弃沉淀；上清转移至另一离心管，加入等体积的氯仿-异戊醇，剧烈振摇10min，再4000rpm，10min；取上层，转移至另一离心管，加入等体积95%乙醇，可见白色丝状沉淀，可用玻棒慢慢缠绕取出沉淀，即为DNA。实验步骤
结果分析与讨论记录DNA提取过程中的现象，结合原理进行分析
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