第七章碳水化合物的测定.pptVIP

四）萨氏法试样+过量铜试剂共热，生成Cu2O，Cu2O在酸性条件下溶解为一价铜离子，并能定量的消耗碘化钾与碘酸钾在酸性条件下反应生成的一定量的游离碘，碘被还原为碘化物，而一价铜被还原为二价铜，剩余的碘用硫代硫酸钠标准溶液滴定，同时做空白实验，根据硫代硫酸钠标准溶液消耗量可求出与一价铜反应的碘量，换算间接知还原糖量。第30页，共67页，星期日，2025年，2月5日五）高锰酸钾滴定法（此法又称贝尔德蓝法Bertrand）样液与过量的费林试剂共热，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜，经过滤，得到氧化亚铜沉淀，加入过量的酸性硫酸铁溶液将其氧化溶解，而三价铁盐被定量还原为亚铁盐，用高锰酸钾标准溶液滴定所生成的亚铁盐，根据高锰酸钾溶液消耗量可计算出氧化亚铜的量，再从检索表中查出氧化亚铜量相当的还原铜量，即可计算出还原糖含量。第31页，共67页，星期日，2025年，2月5日六）其它方法1、碘量法样品经处理后，取一定量样液于碘量瓶中，加入一定量过量的碘液和过量的NaOH溶液，样液中的醛糖在碱性条件下生成醛糖酸钠（稳定）由于反应液中碘和NaOH都是过量的，两者作用生成次碘酸钠，当加入盐酸使呈酸性时，析出碘。用硫代硫酸钠滴定析出的碘，换算知醛糖的量。1mmol碘相当于180mg葡萄糖；342mg麦芽糖；360mg乳糖。第32页，共67页，星期日，2025年，2月5日2、3，5二硝基水杨酸比色法在氢氧化钠和丙三醇存在下——还原糖将3，5二硝基水杨酸中的硝基还原为氨基——氨基化合物在氢氧化钠液中呈桔红色——颜色与还原糖量有线性关系，在540nm波长处有最大吸收。3、半胱氨酸—卡唑法单糖与强酸反应（硫酸）——糠醛及其衍生物——半光氨酸及其卡唑——有色络合物——560nm处有最大吸收。第33页，共67页，星期日，2025年，2月5日二、蔗糖(sucrose)的测定1、原理样品脱脂，用水或乙醇提取，提取液经澄清处理除去蛋白质等杂质，再用盐酸进行水解，使蔗糖转化为还原糖。然后按照还原糖测定方法分别测定水解前后样品液中还原糖含量，两者差值即为由蔗糖水解产生的还原糖量，乘以一个换算系数即为蔗糖含量。第34页，共67页，星期日，2025年，2月5日2、试剂及转化糖标准溶液标定称经105℃烘干的纯蔗糖1.9000g洗入1000mL容量瓶中，定容取50mL于100mL容量瓶中加浓盐酸（6mol/L）5mL摇匀于68～70℃水浴中加热15min迅速冷却加甲基红指示剂2d20%NaOH中和至中性定容备用（含转化糖1mg/mL）。3、测定方法1）F值确定：10mL费林试剂相当于转化糖的质量，mg。第35页，共67页，星期日，2025年，2月5日2）测定方法样品脱脂，用水或乙醇提取澄清去除蛋白质样品液2份各50mL分放于100mL容量瓶中1份加浓盐酸（6mol/L）5mL摇匀于68～70℃水浴中加热15min迅速冷却加甲基红指示剂2d20%NaOH中和至中性、定容另一份用水定容还原糖法测定。第36页，共67页，星期日，2025年，2月5日3）计算蔗糖(%)＝[F×(100/V2－100/V1)]/[m×50/250×1000]×0.95×100式中: F——实测相当于10mL费林试剂对应的转化糖数质量，mg；V2——滴定mL数；V1——空白滴定mL数；m——样品重，g；0.95——换算系数（0.95蔗糖可能转化为1.0g转化糖）。第37页，共67页，星期日，2025年，2月5日4、注意事项a、蔗糖的水解条件远比其他双糖的水解条件低，在本方法规定的水解条件下，蔗糖可完全水解，而其他双糖和淀粉等的水解作用很小，可忽略不计。b、为获得准确的结果，必须严格控制水解条件。c、用还原糖法测定蔗糖时，为减少误差，测得的还原糖含量应以转化糖表示。GB/T5009.8—2003《食品中蔗糖的测定》第38页，共67页，