第六章放射免疫实验.pptVIP

1968年，Miles和Hales创立了免疫放射分析法（IRMA）。IRMA与IRA不同，它是将放射性核素标记在抗体上，而不是标记在抗原上。同时所用的标记抗体与待测抗原比较是过量的。Ag+Ab*Ag-Ab*+Ab*BF由上式可见，IRMA不存在竞争反应，是待测抗原直接与标记抗体反应。待测抗原的量与抗原-标记抗体复合物的量成正相关关系。免疫放射分析法

（immunoradiometricassay，IRMA）第30页，共46页，星期日，2025年，2月5日1.单位点IRMA单位点（one-site）IRMA是利用过量的标记抗体（Ab*）与待测抗原（Ag）进行免疫结合反应，形成抗原标记抗体复合物，当反应达到平衡后，再用固相抗原免疫吸附剂（SP-Ag）与剩余的标记抗体结合，并将其分离。第31页，共46页，星期日，2025年，2月5日2.双位点IRMA将抗体1结合于固相表面，加入标本后，待测抗原与固相抗体形成抗原-抗体复合物，并留在固相表面。洗去其他物质后，加入标记抗体2，在固相表面形成抗体-抗原-标记抗体复合物，再洗去多余标记抗体，即可达到分离目的。第32页，共46页，星期日，2025年，2月5日竞争性分析与非竞争分析的比较第33页，共46页，星期日，2025年，2月5日第三章放射免疫分析放射免疫分析法免疫放射分析法临床应用第34页，共46页，星期日，2025年，2月5日放射免疫分析技术的临床应用一甲状腺疾病二代谢类疾病三骨和矿物质代谢四肿瘤五心血管疾病六器官移植中的药物监控第35页，共46页，星期日，2025年，2月5日一甲状腺疾病TSH促甲状腺激素STSH高灵敏度甲状腺激素FT3血清游离三碘甲状腺原氨酸FT4游离甲状腺素TgAb抗甲状腺球蛋白抗体TmAb抗甲状腺微粒体抗体第36页，共46页，星期日，2025年，2月5日临床上确诊为甲状腺功能亢进的步骤STSH,FT3,FT4STSH↓,FT3↑,FT4↑STSH↓,FT3↑,FT4正常STSH↓,FT3↑,FT4正常确诊甲亢摄131Ⅰ率摄131Ⅰ率摄131Ⅰ率↑摄131Ⅰ率↓T4甲亢（伴有甲肿）病人服T3，（多无甲肿，FT4有时↓）摄131Ⅰ率↑摄131Ⅰ率↓T4甲亢（伴有甲肿）病人服T3，（多无甲肿）摄131Ⅰ率摄131Ⅰ率↑或正常摄131Ⅰ率↓①毒性弥漫性甲肿（Graves病）②多结节甲肿（结节性甲亢）③大的单个结节（自主性结节甲亢）有甲肿时多为：①亚甲炎伴甲亢②碘致甲亢③甲状腺内转移癌伴甲亢无甲肿时多为医源性甲亢第37页，共46页，星期日，2025年，2月5日临床上确诊为甲状腺功能减退的步骤STSH,FT4STSH↑,FT4↓原发性甲低有甲状腺肿无甲状腺肿抗甲状腺抗体阳性①131I治疗后②甲状腺手术后或甲腺外照射③无甲状腺肿克丁病桥本甲状腺炎抗甲状腺抗体阴性①激素合成障碍②药物引起（碘、锂）③碘缺乏症（地甲肿）抗甲状腺抗体阳性抗甲状腺抗体阳性抗甲状腺抗体阴性第38页，共46页，星期日，2025年，2月5日二代谢类疾病胰岛素原（proinsulin）正常生理条件下，胰岛素原分子释放很少，占总分泌5%-10%，因此不考虑其对胰岛素测定的影响。在病理情况下，如胰岛素瘤，血中胰岛素原可达50%-70%。目前，市场上已有用纯胰岛素原做为标准品的放免药盒，可用来直接测定血清或血浆中的胰岛素原含量。第39页，共46页，星期日，2025年，2月5日人真胰岛素(insulinspecific)不经处理的血浆，通过放免法测得的胰岛素称为免疫反应性胰岛素（IRI），IRI与胰岛素原有明显的交叉反应，当血清中胰岛素原含量较高时，应考虑对胰岛素测定的影响。人真胰岛素放免分析可特异性测定人血清中与胰岛素原无交叉反应的胰岛素水平，是确切评价β细胞功能和胰岛素敏感性的关键指标。第40页，共46页，星期日，2025年，2月5日三骨和矿物质代谢1,25二羟基维生素D及25羟基维生素D体内维生素D经日光紫外线照射、且在C1和C25位羟基化后，才能转变为有活性的维生素D代谢物。测定血清中1,25二羟基维生素D及25羟基维生素D的浓度可鉴别与维生素代谢有关的疾病。目前国内用维生素D放免药盒用于维生素D缺乏症、骨营养不良、肝炎和药物性维生素D紊乱、甲状旁腺功能亢进或减退的测定。第41页，共46页，星期日，2025年，2月5日降钙素（CT）和甲状旁腺激素（PTH）CT及PTH参与钙稳态调