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六.真核細胞蛋白質的生物合成2、核糖體差異3、起始物差異真核:Met-tRNAiMet原核:fMet-tRNAfMet六.真核細胞蛋白質的生物合成4、起始密碼差異原核:AUGGUG真核:AUGSD序列無SD序列第三節
蛋白質合成後的加工與運輸一.mRNA與遺傳密碼mRNA(messengerRNA)是蛋白質生物合成過程中直接指令氨基酸摻入的範本,是遺傳資訊的載體。一.mRNA與遺傳密碼原核生物和真核生物mRNA的比較原核細胞mRNA的結構特點5′3′順反子順反子順反子插入順序插入順序先導區末端順序SD區半衰期短許多原核生物mRNA以多順反子形式存在AUG作為起始密碼;AUG上游7~12個核苷酸處有一被稱為SD序列的保守區,與16SrRNA3’-端反向互補而使mRNA與核糖體結合。AGGAGGU5′“帽子”PolyA3′順反子m7G-5′ppp-N-3′p帽子結構功能使mRNA免遭核酸酶的破壞使mRNA能與核糖體小亞基結合並開始合成蛋白質被蛋白質合成的起始因數所識別,從而促進蛋白質的合成。Poly(A)尾巴的功能是mRNA由細胞核進入細胞質所必需的形式它大大提高了mRNA在細胞質中的穩定性AAAAAAA-OH真核細胞mRNA的結構特點二.tRNA與反密碼子同工受體tRNA1.aa由特定的tRNA轉運攜帶相同氨基酸而反密碼子不同的一組tRNA稱為同工受體tRNAtRNAser2.tRNAtRNA轉運活化的氨基酸至mRNA範本上(1)3’端-CCA上的氨基酸接受位點(2)氨醯-tRNA合成酶的識別位點(3)核糖體的識別位點(4)反密碼子位點2.tRNA原核約60種真核約100—120種UGAAUGAUG53原核攜帶N-甲醯甲硫氨酸真核攜帶甲硫氨酸三.rRNA與核糖體短時間*aa大白鼠肝臟勻漿離心分離細胞核線粒體*核糖體上清夜蛋白質合成場所核糖體核糖體是由rRNA(ribosomalribonucleicasid)和多種蛋白質結合而成的一種大的核糖核蛋白顆粒,蛋白質肽鍵的合成就是在這種核糖體上進行的。核糖體1、核糖體的結構和組成2、核糖體的功能核糖體的組成原核生物核糖體的組成原核生物核糖體結構示意圖原核真核核糖體原核細胞70S核糖體的A位、P位及mRNA結合部位示意圖anticodoncodon30S與mRNA結合部位P位(結合或接受肽基的部位)A位(結合或接受AA-tRNA的部位)50S5?3?mRNAA位:氨基醯位(aminoacylsite)P位:肽醯位(peptidylsite)E位:排出位(exitsite)核糖體有三個重要的作用位點四.輔助因數第二節.蛋白質生物合成過程活化、起始、延伸、終止與釋放。一.氨基酸的活化氨基酸+tRNA氨基醯-tRNAATPAMP+PPitRNAATP氨基醯-tRNA合成酶(aminoacyl-tRNAsynthetase)對氨基酸和tRNA都有高度特異性第一步反應氨基酸+ATP+E氨基醯-AMP-E+PPi第二步反應氨基醯-AMP-E+tRNA↓氨基醯-tRNA+AMP+EAla-tRNAAla二.肽鏈合成的起始1、起始密碼子的識別核糖體結合位點AUG的上游8—13nt處SD序列核糖體結合位點距起始密碼子AUG上游約10個核苷酸處有一段可與核糖體16SrRNA配對結合的富含嘌呤的序列,稱為SD序列.一般為AGGAShine-Dalgarno序列SD序列3endof16SrRNA3OH-AUUCCUCCACUAG-5核糖體結合位點★各個基因都有自己的SD序列★每個基因的翻譯都是相對獨立的2、70S起始複合物的形成起始30S亞基mRNAN-甲醯甲硫氨酸-tRNAIF1、IF2、IF3GTP三、延伸進位Tu\Ts迴圈二肽醯-tRNAP位A位肽鍵的形成(轉肽)氨基醯-tRNAfMet-tRNAfMetP位A位肽醯轉移酶移位3
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