第十三章液相色谱法.pptVIP

第1页，共40页，星期日，2025年，2月5日第十三章液相色谱法一、概述二、柱色谱法三、薄层色谱法第2页，共40页，星期日，2025年，2月5日第一节概述一、色谱法的产生及发展二、色谱法的分类三、色谱法的基本原理四、色谱法的特点第3页，共40页，星期日，2025年，2月5日第一节概述一、色谱法的产生及发展1、色谱法的出现2、色谱法的发展3、色谱法的现状和未来第4页，共40页，星期日，2025年，2月5日第一节概述一、色谱法的产生及发展1903年Tswett（茨维特）研究植物叶子组成时发明了色谱法固定相：碳酸钙流动相：石油醚玻璃柱：色谱柱第5页，共40页，星期日，2025年，2月5日第一节概述一、色谱法的产生及发展1931年Kuhn等用氧化铝和碳酸钙分离了α-,β-,γ-胡萝卜素等60多种植物色素1941年Martin和Synge建立了液液分配色谱法并提出气相色谱的设想1952年Martin等发明了气液色谱法1952年Martin和Synge获得诺贝尔化学奖1941年Consden等发展了纸色谱。第6页，共40页，星期日，2025年，2月5日第一节概述一、色谱法的产生及发展1949年Macllean等在氧化铝中加入淀粉粘合剂制作薄层板使薄层色谱法（TLC）得以实际应用，而在1956年Stahl开发出薄层色谱板涂布器之后，才使TLC得到广泛地应用。1957年Golay开创了开管柱气相色谱法，习惯上称为毛细管柱气相色谱60年代末把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱，出现了高效液相色谱（HPLC）。80年代初毛细管超临界流体色谱（SFC）得到发展，但在90年代后未得到较广泛的应用。80年代初由Jorgenson等集前人经验而发展起来的毛细管电泳（CZE），在90年代得到广泛的发展和应用。同时集HPLC和CZE优点的毛细管电色谱在90年代后期受到重视。第7页，共40页，星期日，2025年，2月5日第一节概述一、色谱法的产生及发展1956年VanDeemter等在前人研究的基础上发展了描述色谱过程的速率理论，1965年Giddings总结和扩展了前人的色谱理论，为色谱的发展奠定了理论基础。21世纪色谱科学在生命科学等前沿科学领域发挥不可代替的重要作用。第8页，共40页，星期日，2025年，2月5日第一节概述二、色谱法的分类一）按两相所处状态分类流动相固定相类型液相色谱液体固体液-固色谱液体液体液-液色谱气体固体气-固色谱气体液体气-液色谱气相色谱第9页，共40页，星期日，2025年，2月5日第一节概述二、色谱法的分类二）按操作的形式分平面色谱纸色谱薄层色谱高分子薄膜色谱柱色谱填充柱色谱毛细管柱色谱第10页，共40页，星期日，2025年，2月5日第一节概述二、色谱法的分类三）按分离原理分分配色谱：利用分配系数的不同吸附色谱：利用物理吸附性能的差异离子交换色谱：利用离子交换原理空间排阻色谱：利用排阻作用力的不同第11页，共40页，星期日，2025年，2月5日第一节概述三、色谱法的基本原理指被分离组分在两相中的“分配”平衡过程以吸附色谱为例吸附→解吸→再吸附→再解吸→反复多次洗脱→被测组分分配系数不同→差速迁移→分离微小差异积累→较大差异→吸附能力弱的先出来，吸附能力强的组分后第12页，共40页，星期日，2025年，2月5日第一节概述四、色谱法的特点特点：“三高”、“一快”、“一广”高选择性——可将性质相似的组分分开高效能——反复多次利用组分性质的差异，产生很好分离效果高灵敏度——10-11～10-13g，适于痕量分析分析速度快——几～几十分钟完成分离一次可以测多种样品应用范围广——气体，液体、固体物质，化学衍生化再色谱分离、分析第13页，共40页，星期日，2025年，2月5日第二节柱色谱法一、液-固吸附柱色谱法二、液-液分配柱色谱法三、离子交换驻色谱法四、凝胶柱色谱法第14页，共40页，星期日，2025年，2月5日一、液-固吸附柱色谱法一）吸附作用与吸附平衡二）吸附剂及其选择三）流动相的选择第15页，共40页，星期日，2025年，2月5日一、液-固吸附柱色谱法一）吸附作用与