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多肽鏈折疊為天然的三維結構肽鏈一級結構的修飾肽鏈空間結構的修飾是指從核糖體釋放出不具備蛋白質生物活性的新生多肽鏈,經過分子折疊及不同的加工修飾,轉變為具有天然功能構象的成熟蛋白的過程。翻譯後加工(post-translationprocessing)內容主要包括:2025年7月29日21時22分*一、新生肽鏈的折疊核糖體上新合成的多肽鏈必須經歷一個折疊(folding)過程才能成為具有天然空間構象(nativeconformation)的蛋白質。1961年,安芬森(C.B.Anfinsen)用純化的核糖核酸酶進行體外變性/複性或去折疊/重折疊(unfolding/refolding)實驗證明:蛋白質折疊的全部資訊儲存於肽鏈自身的氨基酸序列中;即蛋白質的空間構象由蛋白質自身的一級結構決定。(榮獲了1972年諾貝爾化學獎)2025年7月29日21時22分*幾種有促進蛋白折疊功能的大分子(三)肽-脯氨醯順反異構酶(三維空間構象形成的限速酶)(peptideprolylcis-transisomerase,PPI)(二)蛋白二硫鍵異構酶(proteindisulfideisomerase,PDI)(一)分子伴侶(molecularchaperon)蛋白質多肽鏈折疊成天然空間構像是一種釋放自由能、形成大量非共價鍵的自發過程;對於核糖核酸酶,其折疊過程在初始或變性狀態都能自動完成,稱為自我組裝(self-assembly)。2025年7月29日21時22分*一、新生肽鏈的折疊分子伴侶的作用:(一)分子伴侶是細胞中一類保守蛋白質,可識別肽鏈的非天然構象,促進各功能域和整體蛋白質的正確折疊。①能有效地封閉(剛合成)蛋白質中的疏水性片段,防止錯誤折疊的發生。②能識別變性的白質,避免或消除蛋白變性後因疏水基團暴露而發生的不可逆聚集,並幫助其複性,或介導其降解;③可識別已經發生錯誤折疊的蛋白質,並幫助其恢復正確的折疊。2025年7月29日21時22分*一、翻譯的起始指mRNA、起始氨基醯-tRNA分別與核糖體結合而形成翻譯起始複合物(translationalinitiationcomplex)的過程。原核生物與真核生物在蛋白質合成起始的共同點:①核糖體小亞基結合起始氨基醯-tRNA;②在mRNA上必需找到合適的起始密碼子;③大亞基必需與已經形成複合物的小亞基、起始氨基醯-tRNA、mRNA結合。2025年7月29日21時22分*原核生物起始密碼子編碼的met需甲醯化CH3SCH2CH2CHH2NCOOtRNAfMet轉甲醯基酶N10-CHO-FH4CH3SCH2CH2CHH-C-HNCOOtRNAfMetO真核細胞起始密碼子編碼的met不需甲醯化2025年7月29日21時22分*起始氨基醯-tRNA:Met-tRNAiMet肽鏈延長甲硫氨醯-tRNA:Met-tRNAMet真核生物原核生物起始氨基醯-tRNA:fMet-tRNAifMet密碼子AUG可編碼甲硫氨酸(Met),同時作為起始密碼。2025年7月29日21時22分*肽鏈延長甲硫氨醯-tRNA:Met-tRNAMet參與形成翻譯起始複合物過程的多種蛋白質因數,稱為起始因數(initiationfactor,IF)。(一)翻譯的起始因數原核生物有三種:真核生物已發現12種eIF。2025年7月29日21時22分*IF-1:佔據A位,防止其結合其他氨基醯-tRNA,並阻止大小亞基的結合;IF-3:與核糖體30S小亞基結合,使之與50S大亞基分開。IF-2:為GTP連接蛋白,能促進起始fMet-tRNAifMet與30S小亞基結合;(二)翻譯起始過程1.原核生物的翻譯起始過程(1)核糖體大小亞基分離(2)mRNA在核糖體小亞基定位結合(3)起始氨基醯-tRNA的結合(4)70S起始複合物形成IF-3IF-1(1)核蛋白體大小亞基分離2025年7月29日21時22分*(2)mRNA與核糖體小亞基定位結合2025年7月29日21時22分*IF-3IF-1AUG531)SD序列
即(Shine-Dalgarno)序列,又稱核糖體結合位點(RBS)2)rpS-1識別序列即小亞基核蛋白(ribosomal
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