基因表达调控课件.pptVIP

（2）原核基因的特異轉錄調節蛋白σ決定著RNA聚合酶識別啟動序列的特異性。P70S1S2S3?P32H1H2H3?P60N1N2N3?σ70σ32σ60不同的σ調節蛋白可介導RNA聚合酶與不同的基因啟動序列結合，啟動不同的基因轉錄。2025年7月29日21時56分*2.真核基因啟動子與RNA聚合酶間的結合（1）在真核基因，由於單獨的RNA聚合酶與啟動子之間的親和力極低或無親和力，兩者間的結合需要TFⅡD等基本轉錄因數從中介導。（2）真核基因啟動子與基本轉錄因數TFⅡD等之間的親和力，決定真核基因特異DNA序列對基因轉錄起始的影響。2025年7月29日21時56分*(1)轉錄調節蛋白與DNA序列之間特異性結合的決定因素：①轉錄調節蛋白多肽鏈中的鹼性氨基酸殘基與戊糖-磷酸骨架之間的正負電荷引力。②轉錄調節蛋白氨基酸殘基與DNA分子堿基之間的相互作用。③還與轉錄因數、DNA的空間結構有關。*酵母單雜交分析DNA-蛋白質的相互作用2025年7月29日21時56分*通常轉錄調節蛋白在與特異性DNA序列結合前，需先通過蛋白質-蛋白質間的相互作用形成轉錄調節蛋白二聚體(dimer)或多聚體(polymer)。在真核生物,一些轉錄調節蛋白不能直接結合DNA，而是通過蛋白質-蛋白質之間的相互作用間接結合在DNA上，或直接與RNA聚合酶相互作用，調節基因轉錄。(2)DNA-蛋白質及蛋白質-蛋白質的相互作用:*酵母雙雜交分析蛋白質-蛋白質的相互作用2025年7月29日21時56分*第三節

原核基因表达调控RegulationofGeneExpressioninProkaryote學習要求：掌握乳糖操縱子的結構及其負性、正性、協調調節；熟悉色氨酸操縱子的結構和調控機制；瞭解原核基因表達翻譯水準的調控。2025年7月29日21時56分*——調節的主要環節在轉錄起始一、原核基因轉錄調控的特點（一）不同σ因數決定著RNA聚合酶特異性識別不同的操縱子（二）操縱子學說的普遍性（三）操縱子基因轉錄阻遏機制的普遍性Jacob和Monod二人獲得了1965年諾貝爾生理學/醫學獎。2025年7月29日21時56分*二、原核生物轉錄起始調節（一）乳糖操縱子(lacoperon)的結構調控區CAP結合位點啟動序列操縱序列結構基因Z：β-半乳糖苷酶Y：透酶A：乙醯基轉移酶ZYAOPCAPDNA2025年7月29日21時56分*結構基因調控區1.阻遏蛋白的負性調節（二）乳糖操縱子的調節機制（或本底水平的組成性表達）2025年7月29日21時56分*半乳糖-1,4-β-葡萄糖半乳糖-1,6-葡萄糖5-溴-4-氯-3-吲哚半乳糖苷(X-gal)發色底物異丙基硫代-β-ο-半乳糖苷(IPTG)強誘導劑2025年7月29日21時56分*半乳糖苷酶半乳糖苷通透酶乳糖半乳糖葡萄糖乳糖別乳糖2.CAP的正性調節CAP/cAMPCAPcAMP：未結合cAMP的CAP不能與DNA結合而無法發揮正性調節作用，轉錄效率下降；結合了cAMP的CAP可與lac操縱子P序列上游的CAP位點識別結合而增強RNA聚合酶的活性，使轉錄的效率提高。2025年7月29日21時56分*阻遏蛋白與O序列結合，lac操縱子處於關閉狀態；並且cAMP濃度低而不能與CAP有效結合，沒有CAP的正性調節作用。3.協調調節CAP的正性調節與阻遏蛋白的負性調節是相互協調的。(1)乳糖不存在，葡萄糖存在或本底水平的組成性表達此時，細菌只利用葡萄糖。2025年7月29日21時56分*阻遏蛋白封閉O序列，lac操縱子處於關閉狀態；雖然cAMP濃度高能與CAP有效結合，但CAP的正性調節仍無法發揮作用。此時的大腸桿菌可能通過表達其他操縱子，以尋求利用環境中存在的其他能源物質。(2)乳糖不存在，葡萄糖也不存在或本底水平的組成性表達2025年7月29日21時56分*雖然阻遏蛋白與O序列解聚，lac操縱子處於開放狀態；但cAMP濃度低而不能與CAP有效結合，故沒有CAP的正性調節，lac操縱子轉錄但水準很低。此時，細菌優先利用葡萄糖。(3)乳糖存在，葡萄糖也存在2025年7月29日21時56分*阻遏蛋白與O序列解聚，同時cAMP濃度高而與CAP有效結合，CAP的正性調節可正常發揮，lac操縱子被快速開