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真蛋白的测定

方法一，盐析法

①试剂

1．硫酸铜溶液：10%，称取50.00g硫酸铜加水溶解，并稀释至500ml

2．氢氧化钠溶液：2.5%，称取12.50g氢氧化钠，加水溶解，并稀释至500ml

3．盐酸标准溶液：0.05mol/L

②真蛋白测定

精确称取样品1g左右，置于250ml烧杯中，加50ml蒸馏水，于电炉上加

热煮沸，加入20ml10%硫酸铜溶液，再在搅拌下缓缓加入20ml2.5%氢氧化钠溶

液，摇匀。从电炉取下，室温放置2小时。沉淀物用中速定性滤纸倾泻法过滤。

并用少量70℃以上热水多次洗涤烧杯和沉淀物，直至滤液无so2+离子（用

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5%BaCl溶液检验无沉淀），连沉淀物一起放入80℃干燥箱中烘至略潮，和入凯

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氏定氮烧瓶中，消化，测定其中的蛋白质含量（同粗蛋白的测定），同时进行空

白测定。另取样品0.5g进行粗蛋白的测定。

方法二：测非蛋白氮（NP）法

①NP的测定

称取15g左右样品（精确到0.1mg）,准确加入100ml5%三氯乙酸溶液，

浸泡振荡2h,静置过滤，精确量取10－20ml滤液定氮（消化时可加2－3滴正辛

醇作消泡剂），同时做空白实验。

②NP的计算

同粗蛋白质（CP）的计算

③真蛋白质（TP）的计算

TP%＝CP%－NP%

真蛋白质的比率＝TP%/CP%*100%

一般来讲，真蛋白质的比率应符合下列数值：

进口鱼粉应≥80%，国产鱼粉≥75%。