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进样器自动进样器手动进样器原理：（六通阀）注入方式：1）全量注入2）部分注入返回第31页，共56页，星期日，2025年，2月5日手动进样器的原理图装填状态进样状态返回第32页，共56页，星期日，2025年，2月5日进样体积检测器响应值定量管体积的一半3倍定量管体积全量注入部分注入进样体积与响应值关系返回第33页，共56页，星期日，2025年，2月5日柱温箱分析结果重现性好提高柱效降低柱压保证检测稳定性柱温控制的优点：第34页，共56页，星期日，2025年，2月5日色谱柱1）柱压低于150kgf/cm2（15cm色谱柱）2）柱温在40℃左右，最高使用温度为50℃3）流动相PH使用范围为2～7.5返回ODS柱的使用注意点：第35页，共56页，星期日，2025年，2月5日流动相注意点离子对试剂的使用具有缓冲盐流动相的使用分析结束及开始流动相平衡加快平衡时间异丙醇的使用第36页，共56页，星期日，2025年，2月5日LC检测器紫外可见检测器（UV/VIS）二极管阵列检测器（PDA）示差检测器（RID）电导检测器（CDD）荧光检测器（RF）电化学检测器（L-ECD）质谱检测器（MS）蒸发光散射检测器（ELSD）第37页，共56页，星期日，2025年，2月5日紫外可见检测器原理：基于被分析组分对特定波长紫外光的选择性吸收定量基础：Lambert-Beer定律，A＝KCL优点：1）对温度和流速变化不敏感2）可用于梯度分析缺点：仅适用于测定有紫外吸收的物质紫外可见检测器第38页，共56页，星期日，2025年，2月5日样品池参比池光电管光电管EinEinEin光栅D2/W灯lEout紫外可见检测器第39页，共56页，星期日，2025年，2月5日岛津VP系列紫外检测器功能1）设定时间程序（波长切换等）2）双波长检测3）比例色谱，初步判断峰的纯度4）停泵扫描，确定组分最大吸收波长NEXT第40页，共56页，星期日，2025年，2月5日HPLCBusinessDeptShimadzuCorporation液相色谱培训第1页，共56页，星期日，2025年，2月5日一、色谱起源石油醚碳酸钙颗粒色素色谱组分第2页，共56页，星期日，2025年，2月5日液相色谱：以液体作为流动相的色谱分离方法适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物的分析流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用气相色谱：以气体作为流动相的色谱分离方法适用于沸点较低、热稳定性好的中小分子化合物的分析流动相只起运载样品分子的能力液相色谱基础知识第3页，共56页，星期日，2025年，2月5日HPLC的分离类型正相色谱(NP-HPLC)反相色谱(RP-HPLC)反相离子对色谱(RPIC)离子交换色谱(IEC)空间排阻色谱(SEC)手性化合物分离模式(Chiralseparationmode)第4页，共56页，星期日，2025年，2月5日液相色谱按两相极性不同分为:正相色谱反相色谱化合物保留时间随流动相配比的变化不同极性的化合物出峰顺序第5页，共56页，星期日，2025年，2月5日正相HPLC色谱柱硅胶型 氰基型 氨基型糖类分析二醇基型蛋白质分析SilicagelSiSi-Si-CH2CH2CH2CN-Si-CH2CH2CH2NH2-Si-CH2CH2CH2OCH(OH)-CH2(OH)ModifiedSi第6页，共56页，星期日，2025年，2月5日反相HPLC色谱柱C18(ODS)typeC8(octyl)typeC4(butyl)typePhenyltypeTMStypeCyanotype-Si-C18H37SiNon-polarproperty第7页，共56页，星期日，2025年，2月5日色谱柱 : 非极性溶剂 : 极性水/甲醇/乙腈反相色谱第8页，共56页，星期日，2025年，2月5日液相色谱流程图输液泵进样器色谱柱柱温箱检测器溶剂数据处理第9页，共56页，星期日，2025年，2月5日流动相流动相选择注意事项：纯度：采用“HPLC”级溶剂避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂对试样有适宜的溶解度溶剂粘度要小与检测器相匹配流动相配制时的顺序第