菝葜抗肿瘤活性部位筛选及其对肿瘤相关巨噬细胞的调控作用和机制研究.docxVIP

·论著·

菝葜抗肿瘤活性部位筛选及其对肿瘤相关巨噬细胞的调控作用和机制研究

唐水燕1，郭迎雪2，陈江琳1，伏杰2，毛伟业3，傅惠英1,2，寿旗扬1,2,3*，冯国富4*(1.浙江中医药大学药学院，杭州310000；2.浙江中医药大学第二临床医学院，杭州310000；3.浙江中医药大学金华研究院，浙江金华321000；4.浙江佐力药业股份有限公司，浙江德清313200)

摘要：目的筛选菝葜醇提物不同极性部位的抗肿瘤活性，并探讨其对肿瘤相关巨噬细胞的调控作用机制。方法体内构建小鼠黑色素瘤皮下移植模型，通过肿瘤体积和肿瘤重量评价菝葜不同极性部位的抗肿瘤作用，并采用小鼠乳腺肿瘤病毒介导多瘤病毒中间T抗原过表达(mousemammarytumorviruspolyomamiddleTantigen，MMTV-PyMT)的乳腺癌小鼠进一步验证，结合流式细胞术探讨活性部位对肿瘤免疫微环境的影响。通过IL-4刺激小鼠腹腔原代巨噬细胞体外构建M2极化模型，流式细胞术检测M1和M2比例。通过网络药理学方法找到菝葜抗乳腺癌的主要信号通路，并采用蛋白免疫印迹法进行验证。结果体内试验结果显示，与B16-F10模型组相比，菝葜醇提物和乙酸乙酯部位组小鼠肿瘤重量显著减轻(P0.01或P0.05)，菝葜正丁醇部位和水部位无抑制肿瘤作用。在MMTV-PyMT小鼠中验证了此结果，并发现与MMTV-PyMT模型组相比，菝葜醇提物和乙酸乙酯部位组小鼠肿瘤组织中M2型肿瘤相关巨噬细胞(CD86?CD206+)浸润显著降低(P0.05)。体外试验结果显示，与模型组相比，菝葜醇提物(100μg·mL?1)和乙酸乙酯部位(12.5、25、50μg·mL?1)能够显著抑制IL-4诱导的M2极化(P0.001)。网络药理学结果显示磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-kinase/proteinkinaseB，PI3K/Akt)信号通路可能是菝葜抗乳腺癌的重要途径。Westernblotting结果显示，与模型组相比，菝葜乙酸乙酯部位50、25μg·mL?1组P-PI3K/PI3K蛋白相对表达量显著降低(P0.001)，P-Akt/Akt蛋白相对表达量也显著降低(P0.01或P0.001)。结论菝葜的抗肿瘤活性部位为乙酸乙酯部位，其抗肿瘤作用与抑制肿瘤相关巨噬细胞M2极化有关，其作用机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路有关。

关键词：网络药理学；巨噬细胞极化；菝葜；乳腺癌；PI3K/Akt信号通路

中图分类号：R285.5文献标志码：A文章编号：1007-7693(2025)07-1051-10

DOI:10.13748/ki.issn1007-7693引用本文：唐水燕,郭迎雪,陈江琳,等.菝葜抗肿瘤活性部位筛选及其对肿瘤相关巨噬细胞的调控作用和机制研究[J].中国

现代应用药学,2025,42(7):1051-1060.

ScreeningofAnti-tumorActiveSitesofSmilaxChinaL.andItsRegulationandMechanismonTumor-associatedMacrophages

TANGShuiyan1,GUOYingxue2,CHENJianglin1,FUJie2,MAOWeiye3,FUHuiying1,2,SHOUQiyang1,2,3*,FENGGuofu4*(1.SchoolofPharmaceuticalSciences,ZhejiangChineseMedicalUniversity,Hangzhou310000,China;2.TheSecondSchoolofClinicalMedicine,ZhejiangChineseMedicalUniversity,Hangzhou310000,China;3.JinhuaAcademyofZhejiangChineseMedicalUniversity,Jinhua321000,China;4.ZhejiangJollyPharmaceutical