第09章 血液细胞分析试剂的研制.pdfVIP

吉林医药学院李艳

深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司李朝阳

温州医科大学王霄霞

学习目标与要求

•掌握血液细胞分析原理及血液细胞分析试剂的主要类

型、关键技术及主要研制方法。

•熟悉血液细胞分析试剂制备的主要影响因素。

•了解血液细胞分析技术的发展。

目录

一、电阻抗原理

二、血红蛋白检测原理

三、稀释液的制备

一、电阻抗原理

血液细胞计数电阻抗原理－库尔特原理：

•当一个不良导体颗粒，例如血液细胞，通过两个电极

之间时，导致电路的电阻抗发生变化。

•血液细胞是电的不良导体。

•当一个细胞通过计数小孔时，会导致小孔两端电阻的

变化，将其转化成脉冲，检测脉冲的数量及大小，从

而计算出通过小孔的细胞数量及体积。

一、电阻抗原理

一、电阻抗原理

脉冲识别波形图

一、电阻抗原理

WBC通道直方图

一、电阻抗原理

淋巴

中性粒细胞

单核

嗜酸

嗜碱

WBC通道直方图

二、血红蛋白检测原理

•在白细胞分析过程中，红细胞溶解剂快速破坏红细胞，

同时将一定比例的血红蛋白转换为稳定的血红蛋白衍生

物，其吸光度与样品的血红蛋白浓度成正比。

•测定吸光度值A，根据朗伯比尔定律即可得出血红蛋白

浓度。

二、血红蛋白检测原理

1.氰化/非氰化试剂比色法测定血红蛋白

•可使用含氰化物的试剂或无氰血红蛋白测定方法。

•样本和HGB试剂在血红蛋白反应池中混合。

•无氰/有氰试剂的血红蛋白化学反应包括两个步骤：

①试剂裂解红细胞释放血红蛋白；②血红蛋白中的血

色素铁从二价铁被氧化为三价铁状态，形成反应生成

物，反应生成物在比色池中经过554nm±10nm波长

的光检测处理后，吸光度与血红蛋白浓度成正比。

二、血红蛋白检测原理

2.二维光学定量检测技术

•红细胞血红蛋白浓度均值（CHCM）和平均红细胞血

红蛋白浓度（MCHC），都提供了对样本中红细胞血

红蛋白的平均浓度的测量方法。

•CHCM是基于红细胞/血小板通道对每个红细胞逐一分

析直接测得的结果，再结合MCV和RBC结果即可得出

总血红蛋白量（HGB）。

•MCHC则是基于总HGB，经MCV和RBC结果计算得

出的参数。

三、稀释液的制备

知识点9-1稀释液的作用及制备的影响因素

•稀释液实质是用于血液细胞分析样本的稀释，制备细

胞悬液，也就是提供环境。

•一方面是血液细胞的适宜环境，另一方面是仪器检测

的测试环境。必须满足维持细胞形态和结构稳定以及

符合仪器检测原理等条件。

•稀释液制备应考虑细胞等渗体系、pH缓冲体系、溶液

电导率等因素。

三、稀释液的制备

1.稀释液测定原理

•稀释液可以使血细胞离散地悬浮于稀释液中，能较长时

间保持血细胞形态的稳定，不相互粘连，并有良好的导

电性。

•稀释液在血液细胞检测过程中为血液细胞提供稳定的溶

液环境、稀释血液样本、形成鞘流、提供电导环境，并

结合阻抗法、比色法、激光散射法及荧光染色的流式细

胞技术进行细胞分类、计数和血红蛋白测定。

三、稀释液的制备

2.稀释液制