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Sheet3
sheet2
sheet1
第三包
第三包抗钙化动物试验生物材料切片观察样品准备
更新日期：2015-11-02
序号
鼠笼编号
试验组
植入部位
工艺顺序（含试剂）
交联
改性
脱细胞处理
热皱缩温度
标准差
直接切片
8KGy辐照后切片
15KGy辐照后切片
0.5%GA
100%2,3-丁二醇
80%乙醇
2%EC
0.125%胰蛋白酶
1%Triton-X-100
48h
3d
7d
20天
72h
8h
24h
数量
标识
笼1
试2
左侧
GA+丁二醇
√
A-1
B-1
C-1
对2-1
右侧
胰酶+T-X-100+GA+丁二醇
A-2
B-2
C-2
笼2
对2-2
GA+丁二醇+胰酶+T-X-100
A-3
B-3
C-3
对2-3
GA+胰酶+T-X-100+丁二醇
A-4
C-4
笼3
对2-进
A-5
B-5
C-5
试3
GA+丁二醇+EC
A-6
B-6
C-6
笼4
对3-1
GA+胰酶+T-X-100+丁二醇+EC
A-7
B-7
C-7
对3-进
A-8
B-8
C-8
笼5
试4
GA+EC+丁二醇
A-9
B-9
C-9
对4-1
GA+EC+丁二醇+胰酶+T-X-100
A-10
B-10
C-10
笼6
试5
左、右侧
GA+乙醇
A-11
B-11
C-11
笼7
试6
GA+乙醇+EC
A-12
B-12
C-12
对6-进
A-13
B-13
C-13
笼8
试7
GA+EC+乙醇
A-14
B-14
C-14
对7-1
GA+胰酶+T-X-100+EC+乙醇
A-15
B-15
C-15
笼9
试8
A-16
B-16
C-16
合计
/
15片
16片
总计
47片
本表格的技术细节：
1、红色底（试1和对1）暂不送样；绿色底（试2、试3）作为送中检所检测的试验组；青绿色底（对2-进、对3-进、对6-进、对8-进）的试验组使用进口牛心包补片；茶色底（试5）在动物植入时，同一只动物植入两片；
2、本表格所有环节的漂洗，均为D-hanks液(无钙\镁)；包括如：采集\返厂途中的保存\初剥\初剥后漂洗\精剥\改性前漂洗\改性后漂洗。牛心包片从采集到进入交联之前的漂洗工艺为D-hanks液漂洗4-6h；
3、本表格中改性前、后的漂洗，都须充分和彻底，去除残留的GA和EC对下一工序的影响；漂洗工艺：手漂洗3次，15分/次，摇床漂洗3小时，换液/每半小时。
4、本表格中的温度要求：①采集(含返厂路途的保存)、初剥、初剥后的漂洗温度，均为4℃（陆续放置hankS冰块）。②改性前、后漂洗\各环节处理后的保存（包括成品保存）温度均为5-10℃；③交联\改性\灭菌温度为20-25℃;
5、本表格中交联/灭菌/保存过程的溶液分别是0.5%GA/0.5%GA/0.3%GA的PBS溶液；
6、本表格所有环节处理后，若保存，均为5-10度下的0.3%GA。但灭菌均在20-25度下的0.5%GA7天（已经认证有效)，灭菌后须重新须更换液体保存。
7、本表格的交联、改性工序使用玻璃容器，包装采用医用级PP材质的包装瓶。
8、本表格每个环节更换液体前，均需对配好的液体(EC溶液无法用PH计检测,用PH试纸)，进行PH测定(部分交联和改性过程中也进行了测定)，要求PH7.35-7.45。
9、本表格共设定17个试验组，笼1-笼5、笼7-笼9对应的试验组，每组10只动物，每只动物的左侧和右侧分布植入对应试验组的材料。笼6对应的试验组，每组5只动物，每只动物植入2片本组材料；
10、本表格的每个试验组，需同步准备热皱缩温度检测的样品（80*20mm规格，4条；青绿色底（进口牛心包片）的数量为2条；）和北京中检所检测的样品（绿色底的试验组，4P6规格，20片；另准备未经改性处理的对照样，4P6规格，20片；）；
更新日期：2015-10-29
8Gy辐照后切片
15Gy辐照后切片
对8-进
GA(进口本底植入)
无
单纯GA
GA
佰仁组
佰仁
18片
49片
注：1.直接切片观察的样品，在0.3%GA中保存（补片小包装瓶）；
2.8Gy和15Gy辐照后切片的样品，在生理盐水中保存（小塑料袋+透析袋包装）；
3.8Gy和15Gy辐照后切片的样品，分别合并成一个大包装，标识辐照剂量；
更新日期：2015-10-28
现有数量
8Gy后切片
15Gy后切片
剩余数量
6+2
9+2
5+2
0+2
1+2
10+2
15+2
7+2
25+2
37+2
8+2
未知工艺
？
规格
8Gy辐照后
切片
15Gy辐照后
切片
1*1cm
脱细胞+GA+丁二醇
GA+丁二醇+脱细胞
GA+脱细胞+丁二醇
GA+脱细胞+丁二醇+EC
GA+EC+丁二醇+脱细胞
GA+脱细胞+EC+乙醇
GA+丁二醇（20天）
1
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