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侯一平版《法医物证学》（第4版）第五章知识点笔记
教材信息：人民卫生出版社2016年版，法医学专业核心教材
章节主题：STR自动分型（法医DNA鉴定的核心自动化技术，衔接PCR扩增与结果判读）
PCR+STR
前序关联：基于第四章技术，通过荧光标记毛细管电泳实现片段的高效分离与
精准分型
一、荧光标记技术（高频考点）
★★
1.核心原理（★★核心考点）
•定义：在PCR扩增阶段，将荧光染料标记于引物的5’端，扩增产物（STR片段）携带荧
光基团，通过检测荧光信号的种类和强度，实现STR片段的“可视化识别”与“长度测
定。”
•技术优势：①无需放射性标记（安全、操作简便）；②可通过不同荧光染料同时标记多个
STR基因座（复合扩增）；③荧光信号强度与片段量正相关，可评估分型质量。
2.常用荧光染料与选择标准
nmnm
荧光染料激发波长（）发射波长（）法医学应用特点
FAM（蓝）494522最常用，标记核心
STR基因座（如
D8S1179、D21S11）
VIC（绿）538554与FAM发射波长差异
显著，适合复合扩增
（如D7S820、
CSF1PO）
NED（黄）546575用于标记额外STR基
因座，避免荧光重叠
（如D13S317、
D16S539）
ROX（红）585602专用内标染料（标记
已知长度的标准片
段，用于校正STR片
段长度）
•选择标准（★高频考点）：①荧光染料间发射波长差异20nm（避免信号重叠，如FAM
与VIC差值32nm）；②染料稳定性高（耐PCR高温，不影响扩增效率）；③荧光强度
适中（避免过强导致信号饱和，过弱导致漏检）。
二、毛细管电泳原理（高频考点）
★★
1.技术优势（对比第四章琼脂糖凝胶电泳）
对比维度琼脂糖凝胶电泳毛细管电泳（CE）
分离效率低（分辨率50-100bp）
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