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课题1微生物的实验室培养(1);
自古以来,人类就一直受到传染病的困扰,可以说,人类文明史就是一部与传染病斗争的历史。
天花、肺结核、鼠疫、霍乱、疟疾、流感、非典型肺炎等,这些传染病夺去了无数人的生
命,给人类带来了无尽的苦难,也深刻影响着文明的进程。
这些传染病大部分都是由细菌、病毒等微生物引起。;
微生物的种类
(1)原核微生物
细菌、蓝藻、衣原体、支原体、放线菌等
(2)真核微生物
酵母菌、霉菌、单细胞藻类、草履虫等
(3)非细胞微生物
病毒;
一、培养基
1.概念——P14
人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
2.类型
(1)按物理性质划分:(2)功能划分:
液体培养基选择培养基
↓加入凝固剂(琼脂)鉴别培养基等
固体培养基等;;;
培养的微生物;
??关培养基营养物质的三点提醒:
(1)培养不同的微生物所需要的营养物质可能不同:
①自养型微生物的培养基主要以无机营养为主。
②异养型微生物的培养基主要以有机营养为主。
(2)对异养微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源、能源。
(3)培养微生物时营养物质要协调:营养物质过少不能满足微生物的营养需要,过多对微生物的生长有抑制作用。;
思考
1、2019年全国Ⅲ卷,37题(1)问:硝化细菌在没有碳源的培养基上(填“能够”或“不能”)生长,原因是?
能够;硝化细菌可以利用空气中的CO2作为碳源。
2、所有的微生物都能用培养基来培养吗?
病毒是一种没有细胞结构的特殊生物。病毒不能独立生存,专性寄生在活的宿主细胞,病毒一旦离开活细胞就不表现任何生命活动。因此,病毒的培养要选择相应的宿主细胞进行培养,如T2噬菌体用大肠杆菌培养。;
1.目的:获得纯净培养物。
2.关键:防止外来杂菌的污染。
如何防止杂菌的污染?可以从四个方面考虑:
“谁来做”——操作者
“在哪做”——操作空间
“用什么做”——培养器皿、接种用具、培养基等“怎么做”——操作过程(酒精灯火焰附近);;
紫外线照射(原理——破坏DNA结构)30min;;
培养基含有水,采用干热灭菌会将水蒸干,无法培养微生物。高压蒸汽灭菌能保持培养基中的水分。在含水状态下将微生物杀死。;
P15旁栏思考:无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?
无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。;
三、大肠杆菌的纯化培养
1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基——
牛肉膏蛋白胨培养基—细菌;
培养基制备步骤:
计算:根据培养基_配方的比例,计算培养基中各成分的用量。
称量:牛肉膏比较_黏稠,可放在称量纸上称量,因易吸潮,称取
时动作要_迅_速_,称后要及时盖上瓶盖。
溶化:牛肉膏和称量纸一同放入烧杯,加水加热后取出称量纸,加
蛋白胨、氯化钠、_琼脂_后加热,使琼脂熔化,然后补水至100mL。加热时要不断用玻棒搅拌,防止_琼脂糊底而导致烧杯破裂。
灭菌:对培养基进行高压蒸汽灭菌。
倒平板:待培养基冷却至50℃左右时,在_酒精灯火焰附近倒平板。;
1.“拔”——将灭过菌的
培养皿放在火焰旁的桌面
上,右手拿装有培养基的
锥形瓶,左手拨出棉塞。;
“拔”
“烧”
“倒”
“倒”;
P17讨论:
1.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?
通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
2.平板冷却凝固后,为什么要将平板倒置?
平板冷凝后,皿盖会凝结水珠。将平板倒置,既可以防止皿盖
上的水珠落入培养基,又可以避免培养基中的水分过快地蒸发。
3.若培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用吗?
不能,会滋生杂菌。
4.怎样判断制备的培养基是否合格、成功,是否受到污染?
未接种的培养基在恒温箱中保温一段时间后,如果无菌落生长,
说明培养基制备成功、合格,未受到污染。;
专题2微生物的培养与应用
课题1微生物的实验室培养(2)
广州市第六中学魏敏;
三、大肠杆菌的纯化培养
1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
2.纯化大肠杆菌
(1)原理——在培养基上得到单个菌落,即可获得较纯的菌种。;
1.概念——P18页
一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细
胞群体。P43必修二:按照菌落表
面的光滑程度,把肺炎双
2.特征——P24页球菌分R型、S型。
菌落特征包括菌落的大小、形状、光泽度、颜色、透明度等。
3.功能——
菌落是鉴定菌种的重要依据。;
菌落微生物培养皿绘画;
三、大肠杆菌的纯化培养
1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
2.纯化大肠杆菌
(1)原理——在培
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