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专题3胚胎工程3.2体外受精和早期胚胎培养;;;
试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条
件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。
意义:可以实现良种家畜的快速大量繁殖。;;
一体外受精
1.卵母细胞的采集和培养
2.精子的采集和获能
3.受精;
1.卵母细胞的采集和培养
方法①:用促性腺激素处理,使其排出更多卵子,从输卵管
中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。
适用生物:小鼠、兔,以及猪、羊等。;
超数排卵处理的做法是给供体注射促性腺激素,使一
头母畜的一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子,用于体外受精和早期胚胎培养。;
1.卵母细胞的采集和培养
方法②:从屠宰场已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞。
方法③:从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。
适用动物:大家畜或大型动物。如:牛。;
采集的卵母细胞,要在体外经人工培养成熟后,才能与获能的精子受精。;
2.精子的采集和获能
(1)收集的方法
假阴道法
手握法
电刺激法;
2.精子的采集和获能
(2)获能处理:
培养法:将精子放入人工配制获能液中培养一段时间后,精子就可获能。如啮齿动物、家兔和猪等动物精子。
化学法:将精子放入一定浓度肝素或钙离子载体A23187溶
液中,用化学药物诱导精子获能。如牛、羊等家畜精子。;
3.受精
获能的精子和培养成熟(减
Ⅱ中期)的卵子,一般情况下在获能溶液或专用受精溶液中完成受精过程。;
3.受精
获能的精子+成熟的卵子(MII
获能液或受精液
受精卵
发育培养液;
二胚胎早期培养
精子和卵子在体外受精后,应将受精卵移入发育
培养液中继续培养,以检查受精状况和受精卵的发育能力。
培养液成分:水、无机盐、糖类、维生素、氨基酸、激
素、核苷酸、血清等。;
胚胎培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。
不同动物胚胎移植时间不同,例如,牛、羊一般要培养到
桑椹胚或囊胚阶段才能移植,小鼠、家兔等动物可在更早阶段移植,人的体外受精胚胎,可在8~16个细胞阶段移植。;
牛体外受精胚胎工厂化生产流程图;
试管牛工业化生产技术流程图
采集良种母牛卵母细胞采集良种公牛精子
卵母细胞的体外培养精子体外获能
体外受精
早期胚胎培养
良种牛体外受精胚胎
胚胎移植
受体牛;
思考:
为什么说关于动物的体内受精和胚胎发育的研究,会为胚胎工程提供理论基础?
在了解哺乳动物自然条件下受精和早期胚胎发育的基础上,人们才
能在体外进行有效的模拟,才使卵母细胞能在体外成熟;精子能在体外完成获能;获能精子和成熟卵母细胞能在试管内完成受精;体外受精卵能在人工培养条件下继续发育等,这些都有赖于体内自然条件下的基础;
体内受精和
早期胚胎发育
体外受精和
早期胚胎培养
胚胎移植;
练习巩固
1.印度沙漠猫是一种珍稀猫科动物,通过胚胎工程技术,可以让家猫代孕而繁育,主要步骤如图所示。下列相关叙述正确的是(B)
A.步骤甲是指精子获能
B.诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞
C.受精卵发育成早期胚胎所需营养主要来源于营养液
D.步骤甲使用的培养液和早期胚胎培养液成分基本相同;
练习巩固
2.下列关于胚胎工程的叙述,错误的是(B)
A.体外受精是指获能的精子和成熟的卵子在相应溶液中受精
B.受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植
C.早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清
D.试管动物技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术;
练习巩固
3.以下是制定并研究设计的“试管牛”工厂化生产技术流程,其中正确的顺序应是(c)
①卵母细胞的采集和培养
②精子的采集和获能
③受精卵培养
④体外受精
⑤胚胎的早期培养
A.①②③④⑤B.①②④⑤③C.①②④③⑤D.①②⑤④③;
练习巩固
4.下列对哺乳动物体内受精、早期胚胎发育过程和胚胎工程的叙述
,正确的是(A)
A.注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育
B.早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清、抗生素和激素等
C.原肠胚时期的细胞具备发育成完整个体的能力,该时期是胚胎移植的最佳时期
D.卵子释放顶体酶溶解放射冠和透明带,卵细胞膜反应是防止多精入卵的屏障之一;谢谢大家!
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