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piRNA管理师高级考试试卷与答案
一、单项选择题（每题2分，共10题）
1.piRNA主要作用于（）
A.基因转录B.翻译后修饰C.染色质重塑D.蛋白质降解
2.以下哪种生物中不存在piRNA（）
A.线虫B.果蝇C.植物D.小鼠
3.piRNA与（）蛋白结合发挥功能
A.ArgonauteB.DicerC.DroshaD.RISC
4.piRNA长度一般在（）
A.18-22ntB.24-31ntC.35-40ntD.45-50nt
5.piRNA基因主要位于（）
A.常染色体B.性染色体C.线粒体D.叶绿体
6.以下关于piRNA表达特点正确的是（）
A.组成型表达B.组织特异性表达C.细胞周期特异性表达D.发育阶段特异性表达
7.piRNA对转座子的调控主要是（）
A.促进转座B.抑制转座C.无影响D.随机作用
8.发现piRNA的模式生物是（）
A.大肠杆菌B.酵母C.线虫D.斑马鱼
9.参与piRNA生物合成的关键酶是（）
A.RNA聚合酶IB.RNA聚合酶IIC.RNA聚合酶IIID.未知聚合酶
10.piRNA可以调控的生物学过程不包括（）
A.生殖细胞发育B.肿瘤发生C.神经发育D.光合作用
二、多项选择题（每题2分，共10题）
1.piRNA参与调控的生理过程有（）
A.生殖细胞发育B.免疫反应C.细胞分化D.细胞凋亡
2.piRNA的来源包括（）
A.基因组重复序列B.编码基因C.线粒体基因D.病毒基因
3.以下哪些蛋白与piRNA通路相关（）
A.AubergineB.PiwiC.Ago2D.Hsp90
4.piRNA在哪些疾病中可能发挥作用（）
A.肿瘤B.神经退行性疾病C.心血管疾病D.糖尿病
5.影响piRNA表达的因素有（）
A.环境因素B.基因变异C.细胞信号通路D.转录因子
6.piRNA与miRNA的区别在于（）
A.长度B.作用机制C.生物合成途径D.靶标类型
7.piRNA可以通过哪些方式调控基因表达（）
A.DNA甲基化B.组蛋白修饰C.mRNA降解D.翻译抑制
8.以下哪些是研究piRNA的技术方法（）
A.高通量测序B.RNA干扰C.荧光定量PCRD.免疫共沉淀
9.piRNA在不同物种间的保守性表现为（）
A.序列保守B.功能保守C.生物合成途径保守D.表达模式保守
10.piRNA与转座子的关系是（）
A.piRNA抑制转座子活性B.转座子可产生piRNAC.两者相互独立D.转座子影响piRNA表达
三、判断题（每题2分，共10题）
1.piRNA只存在于动物细胞中。（）
2.piRNA可以直接调控蛋白质的翻译过程。（）
3.所有的piRNA基因都具有相同的启动子。（）
4.piRNA对转座子的调控是完全随机的。（）
5.植物中也能找到与piRNA功能类似的小分子RNA。（）
6.piRNA与Argonaute蛋白结合形成的复合物不具有核酸酶活性。（）
7.piRNA的表达水平在不同发育阶段是恒定的。（）
8.基因编辑技术可以用于研究piRNA的功能。（）
9.piRNA与mRNA的相互作用是不可逆的。（）
10.piRNA生物合成不需要任何酶的参与。（）
四、简答题（每题5分，共4题）
1.简述piRNA的主要生物学功能。
piRNA主要功能是通过与Piwi蛋白结合形成复合物，沉默转座子元件，维持基因组稳定性；还参与生殖细胞发育调控，确保生殖细胞正常分化和成熟；同时在肿瘤等疾病发生发展中也发挥作用，可调控相关基因表达影响肿瘤进程。
2.简要说明piRNA的生物合成途径。
piRNA生物合成途径较复杂。主要由基因组特定区域转录产生长链非编码RNA前体，经过核酸酶切割，产生初级piRNA。初级piRNA与Piwi家族蛋白结合，之后通过乒乓模型等进一步加工成熟，形成具有活性的piRNA。
3.比较piRNA与siRNA的异同。
相同点：都属于小分子RNA，在基因表达调控中发挥作用。不同点：长度上piRNA更长，一般24-31nt，siRNA约21-23nt；来源不同，piRNA多来自基因组重复序列，siRNA可由外源双链RNA产生；作用机制有差异，piRNA主要沉默转座子维持基因组稳定，siRNA多介导RNA干扰降解靶标mRNA。
4.举例说明研究piRNA功能的常用实验方法。
常用方法有基因敲除或敲低实验，通过CRISPR/Cas9等技术敲除相关基因，观察piRNA功能缺失表型；RNA干扰技术可特异性抑制piRNA表达研究其功能；荧光定量PCR检测piRNA表达水平变化；免疫共沉淀分析与piRNA相互作用的蛋白等。
五、讨论题（每题5分，共4题）
1.讨论piRNA在肿瘤研究中的潜在应用前景。
piRNA在肿瘤研究中有广阔前景。一方面，其表达异常与肿瘤发生发展相关，可作为肿瘤诊
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