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2025年核酸考试的试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共40分）

1.新型冠状病毒核酸检测中，以下哪种样本的病毒载量通常最高？

A.鼻咽拭子

B.口咽拭子

C.痰液

D.粪便

答案：A（鼻咽拭子因采集部位更接近病毒复制的上呼吸道黏膜，通常病毒载量高于口咽拭子；痰液和粪便虽可能检出，但载量较低。）

2.荧光定量PCR检测中，Ct值（循环阈值）的定义是：

A.荧光信号达到仪器本底噪音时的扩增循环数

B.荧光信号达到设定阈值时的扩增循环数

C.扩增结束时的总循环数

D.荧光信号开始指数增长时的循环数

答案：B（Ct值是荧光信号达到设定阈值时所经历的循环数，是定量分析的关键指标。）

3.核酸提取过程中，若使用磁珠法，以下哪一步骤的主要目的是去除蛋白质杂质？

A.裂解

B.结合

C.洗涤

D.洗脱

答案：C（裂解步骤破坏细胞结构释放核酸；结合步骤使核酸与磁珠结合；洗涤步骤通过缓冲液去除蛋白质、盐类等杂质；洗脱步骤将核酸从磁珠上分离。）

4.实验室进行核酸检测时，生物安全柜的使用需遵循“前窗操作口气流流速不低于”的要求，其标准值为：

A.0.25m/s

B.0.5m/s

C.0.75m/s

D.1.0m/s

答案：B（根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》，Ⅱ级生物安全柜前窗操作口气流流速应不低于0.5m/s，以确保有效防护。）

5.以下哪种情况不会导致核酸检测出现假阴性？

A.采样时未到达规定深度（如鼻咽拭子未触及咽后壁）

B.样本保存时间过长（超过72小时未-70℃保存）

C.扩增反应体系中Taq酶浓度过高

D.引物与病毒变异区域不匹配

答案：C（Taq酶浓度过高可能导致非特异性扩增（假阳性），而非假阴性；其他选项均可能因样本质量差、引物失效等导致假阴性。）

6.核酸检测实验室分区中，“扩增产物分析区”的主要功能是：

A.样本接收与处理

B.核酸提取

C.PCR反应体系配制

D.PCR扩增后产物的检测

答案：D（实验室分区遵循“单向流程”原则，依次为：样本处理区（样本接收、灭活、分装）→核酸提取区→扩增体系配制区→扩增区→扩增产物分析区（如荧光检测或电泳）。）

7.新型冠状病毒核酸检测试剂的性能验证中，“临床灵敏度”主要评估的是：

A.检测试剂对阴性样本的正确识别能力

B.检测试剂对阳性样本的正确识别能力

C.试剂在不同温度下的稳定性

D.试剂对其他冠状病毒的交叉反应

答案：B（临床灵敏度=真阳性数/(真阳性数+假阴性数)×100%，反映试剂检出阳性样本的能力；临床特异度反映检出阴性样本的能力。）

8.采样人员穿戴防护装备时，最后佩戴的是：

A.医用防护口罩（N95）

B.护目镜/防护面屏

C.一次性工作帽

D.乳胶手套

答案：B（正确穿戴顺序：工作帽→医用防护口罩→防护服→手套→护目镜/防护面屏；脱卸时则相反，先摘护目镜。）

9.对于新冠病毒核酸检测的混采样本（10:1混采），若检测结果为阳性，应采取的处理措施是：

A.直接报告混采管阳性，无需进一步检测

B.对混采管中10份样本分别单独检测，确认阳性个体

C.将混采管样本稀释后重新检测

D.更换检测试剂品牌后重新检测

答案：B（混采阳性需对原混采管中的所有单份样本进行单检，以确定具体阳性个体，避免漏诊或误判。）

10.核酸提取仪日常维护中，以下哪项操作不符合要求？

A.每日使用75%乙醇擦拭仪器表面

B.每月检查磁珠吸附模块的机械灵敏度

C.连续运行100次后未更换一次性吸头

D.发现试剂残留时立即用去离子水清洁管路

答案：C（一次性吸头需每批次更换，避免交叉污染；其他选项均为常规维护措施。）

11.以下关于反转录PCR（RT-PCR）的描述，错误的是：

A.需先将RNA反转录为cDNA

B.反转录酶的最适温度通常为42℃左右

C.可同时检测DNA和RNA病毒

D.扩增产物为DNA片段

答案：C（RT-PCR专门用于检测RNA病毒，需先通过反转录将RNA转为cDNA；DNA病毒检测无需反转录步骤。）

12.实验室质量控制中，“弱阳性对照”的主要作用是：

A.验证检测系统的最低检出能力

B.确认试剂未被污染

C.评估仪器的稳定性

D.检测扩增抑制物的存在

答案：A（弱阳性对照通常为接近检测限的低浓度阳性样本，用于验证检测系统能否准确检出低病毒载量样本；阴性对照用于确认无污染，内