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2025年核酸检查试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共40分）

1.新型冠状病毒核酸检测的主要靶标基因不包括以下哪项？

A.ORF1ab基因

B.N基因

C.E基因

D.S蛋白编码基因

答案：D

解析：目前新冠核酸检测主要针对病毒保守区域的ORF1ab、N、E基因，S蛋白编码基因变异率较高，通常不作为常规检测靶标。

2.核酸提取过程中，若使用磁珠法，关键步骤是利用磁珠与核酸的哪种特性结合？

A.电荷吸附

B.疏水作用

C.特异性碱基互补

D.金属离子桥接

答案：A

解析：磁珠表面修饰有硅羟基或氨基，通过电荷吸附作用与核酸结合，在不同盐浓度和pH条件下实现核酸的捕获与释放。

3.实时荧光定量PCR（qPCR）中，Ct值的定义是？

A.荧光信号达到设定阈值时的扩增循环数

B.扩增结束时的荧光信号强度峰值

C.引物与模板结合的初始循环数

D.反应体系中荧光染料完全消耗的时间点

答案：A

解析：Ct（CycleThreshold）值指荧光信号达到设定阈值时所经历的循环数，是定量分析的核心参数。

4.咽拭子采样时，正确的操作要求是？

A.棉签头轻触咽后壁1次即可

B.擦拭双侧扁桃体及咽后壁至少3次

C.采样前患者需用生理盐水漱口

D.采样后棉签需完全浸没于2ml病毒保存液中

答案：B

解析：规范采样需擦拭双侧腭弓、扁桃体及咽后壁，每处至少3次，确保采集到足够的上皮细胞和病毒。

5.核酸检测实验室分区中，哪一区域需设置为负压环境？

A.试剂准备区

B.样本处理区（核酸提取区）

C.扩增区

D.产物分析区

答案：B

解析：样本处理区（核酸提取区）因涉及样本开盖、核酸释放等操作，需维持负压（相对于相邻区域-5Pa至-10Pa），防止含病毒气溶胶扩散。

6.以下哪种样本类型不适合用于新冠病毒核酸检测？

A.深咳痰液

B.鼻拭子

C.粪便

D.指尖血

答案：D

解析：新冠病毒主要感染呼吸道上皮细胞，血液（尤其是指尖血）病毒载量极低，通常不作为常规检测样本。

7.qPCR反应体系中，UNG酶（尿嘧啶-N-糖基化酶）的主要作用是？

A.提高扩增效率

B.降解残留的dUTP标记产物

C.防止引物二聚体

D.增强荧光信号稳定性

答案：B

解析：UNG酶可特异性水解含dUTP的扩增产物，避免前一次扩增产物污染当前反应体系，是实验室防污染的关键措施。

8.核酸检测结果报告中，“未检测到目标核酸”的表述需满足的条件是？

A.阴性对照无扩增，内标Ct值≤35

B.阴性对照无扩增，内标Ct值≤40

C.阳性对照Ct值≤30，内标无扩增

D.阳性对照Ct值≤35，内标Ct值≤40

答案：A

解析：结果有效需满足阴性对照无扩增（避免污染），内标（监测样本质量）Ct值≤35（若超过35提示样本可能降解或采集不合格）。

9.冷冻保存的核酸样本（-20℃）最长可保存多久？

A.1周

B.1个月

C.3个月

D.6个月

答案：B

解析：根据《新型冠状病毒核酸检测技术指南》，核酸提取后若不能立即检测，-20℃保存不超过1个月，-70℃可延长至6个月。

10.采样人员穿脱防护装备时，关键的手卫生步骤应在何时进行？

A.戴手套前、脱手套后

B.戴口罩前、摘口罩后

C.穿防护服前、脱防护服后

D.以上均需

答案：D

解析：手卫生需贯穿防护装备穿脱全过程，包括戴手套/口罩/防护服前，以及脱除后，避免交叉污染。

11.以下哪种情况会导致qPCR出现“假阴性”结果？

A.样本采集时未触及感染部位

B.扩增仪温度校准偏差+0.5℃

C.引物浓度过高

D.荧光阈值设置过低

答案：A

解析：样本采集不规范（如未触及咽后壁）会导致病毒载量不足，是假阴性的主要原因；温度偏差或引物浓度过高可能影响Ct值，但未必导致假阴性；阈值过低可能导致假阳性。

12.核酸检测实验室的“单一流向”原则是指？

A.人员、物品从清洁区→半污染区→污染区单向移动

B.试剂、样本从高风险区→低风险区移动

C.空气从污染区→半污染区→清洁区流动

D.废弃物从清洁区→污染区集中处理

答案：A

解析：实验室分区遵循“单一流向”，即人员、物品只能从清洁区（试剂准备）→半污染区（样本处理）→污染区（扩增及产物分析）移动，避免交叉污染。

13.病毒保存液（如灭活型）的主要成分不