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pcr实验室试题题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的发明者是（）

A.穆利斯

B.桑格

C.吉尔伯特

D.沃森

答案：A

解析：穆利斯发明了PCR技术，为基因扩增等研究提供了重要手段。桑格主要贡献在测序技术；吉尔伯特在DNA测序方面也有重要成就；沃森发现了DNA双螺旋结构。

2.PCR反应体系中，起催化作用的酶是（）

A.DNA聚合酶

B.RNA聚合酶

C.限制性内切酶

D.连接酶

答案：A

解析：PCR反应依靠DNA聚合酶来催化DNA的合成，以引物为起点延伸DNA链。RNA聚合酶用于转录；限制性内切酶用于切割DNA；连接酶用于连接DNA片段。

3.PCR反应的温度循环中，变性温度一般是（）

A.55℃

B.72℃

C.95℃

D.100℃

答案：C

解析：95℃左右可使双链DNA变性解链为单链，以便后续引物结合和延伸。55℃通常是引物退火温度；72℃是DNA聚合酶延伸的适宜温度；100℃一般不是PCR标准温度。

4.PCR实验室分区中，样本制备区的主要功能是（）

A.PCR扩增

B.产物分析

C.样本核酸提取等

D.试剂配制

答案：C

解析：样本制备区主要进行样本的采集、处理及核酸提取等操作，为后续PCR反应做准备。PCR扩增在扩增区；产物分析在产物分析区；试剂配制在试剂准备区。

5.防止PCR实验室污染的关键措施不包括（）

A.严格分区

B.规范操作

C.使用高质量试剂

D.频繁更换实验人员

答案：D

解析：严格分区可避免不同实验阶段产物交叉污染；规范操作减少人为污染风险；高质量试剂杂质少。频繁更换人员可能因操作习惯等差异增加污染几率，不是防止污染关键措施。

6.PCR产物电泳检测时，常用的核酸染料是（）

A.溴酚蓝

B.考马斯亮蓝

C.溴化乙锭

D.甲基绿

答案：C

解析：溴化乙锭能插入核酸双链中，在紫外光下发出荧光，便于观察PCR产物条带。溴酚蓝用于指示电泳进程；考马斯亮蓝用于蛋白质染色；甲基绿主要用于染DNA。

7.以下哪种物质不是PCR反应的原料（）

A.dNTP

B.引物

C.Taq酶

D.Mg2?

答案：C

解析：dNTP是合成DNA的原料；引物引导DNA合成起始；Mg2?是Taq酶活性所需离子。Taq酶是催化反应的酶，不是原料。

8.PCR反应中，引物长度一般为（）

A.5-10bp

B.10-15bp

C.15-30bp

D.30-50bp

答案：C

解析：15-30bp的引物长度既能保证特异性结合模板，又有利于与模板充分结合并引导延伸反应。过短特异性差，过长可能影响结合效率。

9.PCR实验室空气流向应为（）

A.试剂准备区→样本制备区→扩增区→产物分析区

B.样本制备区→试剂准备区→扩增区→产物分析区

C.扩增区→样本制备区→试剂准备区→产物分析区

D.产物分析区→扩增区→样本制备区→试剂准备区

答案：A

解析：这样的流向可防止不同区域的气溶胶等污染物逆向流动造成污染，保证实验准确性。

10.实时荧光定量PCR技术不能用于（）

A.基因表达定量分析

B.病原体核酸定量检测

C.基因突变检测

D.基因分型

答案：D

解析：实时荧光定量PCR主要用于核酸定量分析，如基因表达量、病原体载量等。基因突变检测一般通过测序等方法；基因分型有多种技术手段，实时荧光定量PCR通常不用于此。

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应体系通常包括（）

A.模板DNA

B.引物

C.dNTP

D.Taq酶

答案：ABCD

解析：模板DNA是扩增的起始序列；引物引导合成；dNTP提供合成原料；Taq酶催化DNA合成，这些都是PCR反应必需的。

2.PCR实验室的主要设备有（）

A.核酸扩增仪

B.离心机

C.移液器

D.冰箱

答案：ABCD

解析：核酸扩增仪用于PCR反应；离心机可用于样本处理等；移液器准确移取试剂；冰箱保存试剂和样本，这些都是PCR实验室常用设备。

3.下列属于PCR反应特点的有（）

A.特异性强

B.灵敏度高

C.操作简便

D.可大量扩增

答案：ABCD

解析：通过引物特异性结合模板，特异性强；能扩增微量核酸，灵敏度高；操作相对简单；在短时间内可大量扩增目的片段。

4.PCR实验室质量控制的内容包括（）

A.人员培训

B.试剂质量

C.仪器校准

D.环境监测

答案：ABCD

解