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病原微生物实验室生物安全知识问答

一、实验室分级与病原分类

问：我国病原微生物实验室分为哪几个级别？不同级别实验室的核心防护要求有何区别？

答：根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》，实验室分为BSL-1（一级）、BSL-2（二级）、BSL-3（三级）、BSL-4（四级）四个级别，防护要求随级别升高而严格：

BSL-1：基础防护，适用于低风险病原（如非致病性大肠杆菌），无需特殊隔离，实验人员穿普通工作服、戴手套即可；

BSL-2：加强防护，适用于中等风险病原（如流感病毒、乙肝病毒），需设置生物安全柜、高压灭菌器，实验人员需穿防护服、戴护目镜，废弃物需灭菌处理；

BSL-3：高级防护，适用于高风险、可通过空气传播的病原（如新冠病毒、肺结核杆菌），实验室需负压通风、设置气锁间，实验人员穿正压防护服，进出需严格消毒；

BSL-4：最高防护，适用于极高风险、无有效治疗手段的病原（如埃博拉病毒），实验室为完全隔离结构，实验人员穿全封闭正压防护服，操作需在三级生物安全柜内进行。

问：病原微生物如何分类？不同类别病原的实验活动审批要求有何不同？

答：病原微生物分为第一类、第二类、第三类、第四类，风险随类别降低而降低：

第一类、第二类：高致病性病原（如埃博拉病毒、新冠病毒），开展实验活动需经省级以上卫生健康或农业农村部门审批，且只能在BSL-3或BSL-4实验室进行；

第三类、第四类：低致病性病原（如普通细菌、非致病性病毒），开展实验活动只需向实验室所在地县级卫生健康部门备案，可在BSL-1或BSL-2实验室进行。

二、人员管理与个人防护

问：病原微生物实验室工作人员需具备哪些资质？入职前需完成哪些培训？

答：工作人员需具备的资质与培训要求如下：

资质要求：年满18周岁、身体健康（无传染病及职业禁忌证）、具备相关专业学历（如医学、生物学），BSL-3及以上实验室人员需通过国家统一的生物安全考核；

入职培训：需完成理论培训（病原特性、防护知识、条例法规）和实操培训（生物安全柜操作、防护服穿脱、应急处置），培训后需通过考核（理论满分100分≥80分，实操满分100分≥90分），方可上岗。

问：实验人员在BSL-2实验室操作时，个人防护装备（PPE）的穿脱顺序有何规范？

答：BSL-2实验室PPE穿脱需严格遵循“先里后外、先穿后戴”“先脱污染部位、后脱清洁部位”原则：

穿脱顺序：

穿：洗手→戴一次性帽子→戴医用外科口罩→穿防护服→戴护目镜→戴一次性手套（手套袖口需覆盖防护服袖口）；

脱：在生物安全柜旁脱手套→脱护目镜→脱防护服（从颈部解开拉链，向外翻卷脱下，避免接触内侧清洁面）→脱口罩（先解下绳，再解上绳，避免触碰口罩外侧）→脱帽子→洗手消毒（用含酒精洗手液揉搓20秒以上）。

三、实验操作与设备管理

问：生物安全柜是实验室核心防护设备，使用前需做哪些检查？操作时有哪些禁止事项？

答：使用前检查与禁止事项如下：

使用前检查：①检查通风系统（风速仪检测进风风速≥0.38m/s，排风风速符合要求）；②检查紫外灯、照明是否正常；③用75%酒精擦拭工作台面，开启紫外灯消毒30分钟后关闭，再通风15分钟方可使用；

禁止事项：①禁止放置与实验无关的物品（如手机、笔记本）；②禁止在柜内进行产生剧烈气流的操作（如快速晃动离心管）；③禁止将手臂频繁进出柜内，避免破坏气流屏障；④禁止在紫外灯开启时操作（防止灼伤皮肤与眼睛）。

问：实验室高压灭菌器用于病原微生物废弃物灭菌，操作时需注意哪些关键要点？

答：高压灭菌器操作需严格把控“温度、时间、压力”三要素，关键要点如下：

灭菌前：①检查灭菌器水位（需高于加热管）；②废弃物需装在耐高温密封容器中，容器内液体不超过80%容积，避免灭菌时溢出；③放置物品时留出间隙，保证蒸汽流通；

灭菌中：①设置参数（温度121℃、压力0.103MPa、时间20-30分钟，含病原的废弃物需延长至30分钟）；②灭菌过程中禁止打开舱门，若出现压力异常，需先排气降压至零，再排查故障；

灭菌后：①待压力自然降至零、温度低于80℃后，方可打开舱门；②取出物品后，确认废弃物已完全灭菌（如用生物指示菌检测，阴性为合格），再按普通垃圾处理。

四、废弃物与环境管理

问：病原微生物实验室的废弃物分为哪几类？不同类别废弃物的处理流程有何区别？

答：实验室废弃物主要分为感染性废弃物、病理性废弃物、损伤性废弃物、化学性废弃物，处理流程不同：

感染性废弃物（如实验后的培养基、吸头）：需装入黄色医疗垃圾袋，密封后标记“感染性废物”，经高压灭菌（121℃、30分钟）后，由有资质的医疗废物处置公司清运；

病理性废弃物（如动物组织、血液样本）：需浸泡在含有效氯