适用于动物肌肉干细胞大规模培养的新型支架材料的研究.pdfVIP

摘要

近年来，细胞培育肉以其可持续的生产方式和高效的生产效率逐渐被人类视为一

种有前途的替代肉类食品。目前细胞培育肉产品正在快速向工业化、市场化推进，而

实现产业化的首要目的是提高产能、降低成本、提升品质。而寻找一种适合体外大规

模培养动物肌肉干细胞的支架则是生物培育肉降低成本的一个重要方法。本论文旨在

讨论商用水凝胶与脱细胞植物支架这两种新型材料，在动物肌肉干细胞体外大规模培

养的应用。通过表征它们的理化性质和评估它们的生物相容性，讨论这两种材料作为

细胞培育肉支架的可行性。

选用CulX™仿生基质，由矩阵（天津）生物科技有限公司开发的一种由合成材料

混合而成。实验将该材料稀释成不同0.1wt%、0.3wt%、0.6wt%三个浓度后，讨论该材

料的通过流变测试和傅里叶红外光谱探究其理化性质，通过CCK8增殖实验探究细胞

在不同浓度支架的增殖率，通过生化分析仪分析含不同浓度支架的培养基中的葡萄糖

和乳酸的变化。结合细胞培养过程中的实际情况，得出结论，浓度为0.3wt%的支架最

适宜动物肌肉干细胞的体外大规模增殖培养，浓度为0.6wt%的支架则适宜细胞分化。

天然植物通过十二烷基硫酸钠（SDS）浸泡处理后，脱去植物细胞，得到纤维素

骨架。我们讨论了五种植物来源的脱细胞支架，并将脱细胞支架与明胶和胶原蛋白通

过浸泡和冷冻干燥复合，得到复合后的纤维素支架。实验通过显微镜观察不同植物来

源支架的孔径对傅里叶变换红外光谱探究了其理化性质，通过扫描电子显微镜（SEM）

的测试观察支架的微观形貌，以及MTT实验对比细胞在不同支架上的增殖状态，通

过免疫荧光染色验证成肌细胞的成肌分化潜力。结果说明，不同植物来源的支架的孔

径有较大区别，并且植物基支架的孔径影响着植物脱细胞效率，而浸泡和冷冻干燥均

可以使蛋白与植物纤维素复合。天然的植物基支架和复合植物基支架均可以使细胞生

长，但是细胞生长效率不同。通过不同的材料A支架的细胞增殖实验，得到胶原冻干

处理的支架的生物相容性最高，并且细胞在胶原冻干处理后的纤维素支架上生长后仍

有成肌分化的潜力。最后验证不同的胶原冻干植物基支架与天然植物基支架相比，细

胞的增殖率均有提升。

关键词：纤维素；支架；三维培养；细胞培养；培育肉

ABSTRACT

Inrecentyears,cultivatedmeathasgraduallybeenregardedasapromisingalternative

meatfoodbyhumansduetoitssustainableproductionmethodandhighproductionefficiency.

Cultivatedmeatproductsarerapidlyadvancingtowardindustrializationandmarketization,

andtheprimarypurposeofindustrializationistoincreaseproductioncapacity,reducecosts,

andimprovequality.Findingascaffoldsuitableforlarge-scalecultureofanimalmusclestem

cellsinvitroisanimportantwaytoreducethecostofbiologicallycultivatedmeat.Thisthesis

aimstodiscusstheapplicationoftwonewmaterials,commercialhydrogelanddecellularized

plantscaffold,inthelarge-scalecultureofanimalmusclestemcellsinvitro.By

characterizingtheirphysicochemicalpropertiesandevaluatingtheirbiocompatibility,the

feasibilityofthesetwomaterialsascultiva