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基于SRAP技术的多花黑麦草遗传图谱构建与重要农艺性状QTL分析

一、引言

1.1研究背景与目的

多花黑麦草（Loliummultiflorum），又名意大利黑麦草，隶属禾本科黑麦草属，是一年生或越年生草本植物。它原产于欧洲南部、非洲北部以及小亚细亚等地，如今在世界范围内广泛栽培，在草地畜牧业发展中扮演着举足轻重的角色。多花黑麦草具有叶片柔软、味道可口、营养丰富的特点，富含蛋白质和维生素，是牲畜优质的饲料来源，能够有力地促进牲畜的生长发育。同时，它还具备快速生长、茂密生长的特性，可用作草地覆盖植物，有效防止水土流失，保护土壤和水资源；在园林绿化中也有应用，可用于草坪、绿化带、景观花坛等地，美化环境；其根系较为发达，能改良土壤结构，增加土壤肥力。在我国，随着畜牧业的快速发展，对优质牧草的需求日益增长。多花黑麦草作为一种重要的牧草资源，在我国南方地区广泛种植，为解决冬春季节天然牧草枯黄、缺草的问题发挥了关键作用。

遗传图谱构建和数量性状基因座（QTL）分析是植物遗传学研究的重要内容。遗传图谱是指通过遗传标记之间的重组交换值，将基因或DNA分子标记标定在染色体上构建的连锁图谱，它能够直观地展示基因在染色体上的位置以及基因之间的相对距离，是研究植物遗传变异、基因定位、分子标记辅助育种等的重要工具。QTL定位则是利用分子标记技术，将控制数量性状的基因定位到染色体的特定区域，明确其与分子标记之间的连锁关系，从而为深入研究数量性状的遗传机制奠定基础。

相关序列扩增多态性（SRAP）标记技术是由美国加州大学Li与Quiros在2001年创建的一种基于PCR的新型分子标记技术。该技术具有简便、中高共显性、易于分离和测序、无需预知物种序列信息等优点，近年来在植物遗传多样性分析、种质鉴定、图谱构建、基因定位等方面得到了广泛应用，在狗牙根、鸭茅、垂穗披碱草、老芒麦、结缕草等牧草研究中均有大量相关报道。

本研究旨在利用SRAP标记技术构建多花黑麦草的遗传图谱，并对其重要农艺性状进行QTL分析，明确控制这些性状的基因在染色体上的位置和效应，为多花黑麦草的遗传改良和分子标记辅助育种提供理论依据和技术支持，进而培育出产量更高、品质更优、适应性更强的多花黑麦草新品种，满足畜牧业发展对优质牧草的需求。

1.2国内外研究现状

在多花黑麦草遗传图谱构建方面，国内外学者已开展了诸多研究并取得了一定成果。丁成龙等利用多花黑麦草细胞质雄性不育（CMS）F1群体，采用SSR、AFLP、EST-CAPS和RGA-CAPS等标记方法，分别对父本和母本构建了遗传连锁图。母本连锁图包含362个标记位点，由7个连锁群组成，覆盖全长776.4cM，相邻标记之间的平均距离为2.14cM；父本连锁图包含376个标记，7个连锁群，全长710.0cM，相邻标记之间的平均距离为1.89cM，该图谱标记密度高、分布均匀、长度中等。然而，这些图谱构建所使用的标记技术存在一定局限性，如AFLP标记技术操作复杂、成本较高，且对实验条件要求严格；SSR标记数量有限，多态性不够丰富等。相比之下，SRAP标记技术具有独特优势，但目前在多花黑麦草遗传图谱构建中的应用相对较少。

在多花黑麦草QTL定位研究方面，也有不少学者进行了探索。米福贵等对多年生黑麦草叶片长度数量性状位点进行了研究，为黑麦草相关性状的遗传解析提供了参考。但多花黑麦草的QTL定位研究还不够系统和深入，已定位的QTL数量有限，且对一些重要农艺性状，如株高、叶长、叶宽、叶绿素含量、抽穗期等的QTL分析还不够全面。此外，不同研究之间由于实验材料、标记技术和分析方法的差异，结果可比性较差，这在一定程度上限制了多花黑麦草QTL定位研究的进一步发展和应用。

1.3研究意义

本研究利用SRAP构建多花黑麦草遗传图谱及进行重要农艺性状的QTL分析具有重要的理论和实践意义。

从理论层面来看，有助于深入揭示多花黑麦草重要农艺性状的遗传机制。通过QTL定位，能够确定控制这些性状的基因在染色体上的位置、效应以及基因之间的互作关系，为从分子水平理解多花黑麦草的生长发育、产量形成和品质调控等过程提供依据，丰富植物遗传学理论，推动多花黑麦草基础研究的发展。

在实践应用方面，对多花黑麦草的遗传改良具有重要指导作用。传统的多花黑麦草育种主要依赖于表型选择，周期长、效率低且准确性差。而基于遗传图谱和QTL分析的分子标记辅助育种技术，能够在早期对目标性状进行选择，大大缩短育种周期，提高育种效率。通过筛选与优良农艺性状紧密连锁的SRAP分子标记，可在育种过程中快速准确地鉴定出具有优良性状的个体，加速优良品种的选育进程，为培育高产、优质、抗逆性强的多花黑麦