植物组织培养上海农林上海市农业学校植物科学技术系75课件.pptxVIP

植物组织培养;项目三培养基制备;任务5培养基母液配制;【能力目标】

掌握MS培养基的主要成分

学会配制MS培养基母液

【情感目标】

培养学生任务执行力、规范操作、注意安全

具有科学严谨、实事求是的工作态度

具有团队合作交流意识和生态环保意识;一、培养基成分

培养基的成分主要包括水、无机营养、有机成分、植物生长调节剂、培养物的支持材料（如天然有机物、活性炭、抗生素、硝酸银、抗氧化剂、凝固剂等)。;1、水

代谢过程的介质和溶媒。

在配制过程中基本上用蒸馏,保证母液及培养基成分的精确性，防止贮藏过程中发霉变质。

在大量生产过程中，用的是自然水。;2、无机营养

植物所需浓度大于0.5mmol/L的矿质元素称为大量元素。

（N、P、K、Ga、Mg、S）

植物所需浓度小于0.5mmol/L的矿质元素称为微量元素。

（Fe、Mn、Cu、Mo、Zn、Co、B）

;（一）大量元素

1）N

功能：是蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分，是生命结构和功能物质不可缺少的。;2）P

功能：是磷脂的主要成分，而磷脂又是细胞膜、细胞核的重要组成部分。磷也是核酸、ATP、辅酶等的组成成分。;3）K

功能：K对碳水化合物合成、转移、以及氮素代谢等有密切关系，它具有活化酶的作用。;4）Mg、S和Ga

功能：Mg是叶绿素的组成成分，又是激酶的活化剂；

S是含硫氨基酸所构成蛋白质的组成成分。

Ga是构成细胞壁的一种成分，对细胞分裂、保护质膜不受破坏有显著作用;（二）微量元素

功能：铁是一些氧化酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶等的组成成分。同时，它又是叶绿素形成的必要条件。;如缺氮，会表现出一种花色素苷的颜色，不能形成导管；缺铁，细胞停止分裂；缺硫，表现出非常明显的褪绿；缺锰或钼，则影响细胞的伸长;3、有机成分

（1）碳水化合物

糖类（碳源、能量，维持培养基一定的渗透压。）使用浓度：2--3%，常用3%。

;

（2）维生素类

种类：主要有VB1（盐酸硫胺素）、VB6（盐酸吡哆醇）、VB3(烟酸)、VC(抗坏血酸)等。一般用量为0.1-1.0mg/L。;（3）肌醇

构建细胞壁。一般浓度???100mg/L

;

（4）氨基酸

常用种类：甘氨酸。在10-1000mg/L之间。;（5）天然有机化合物

常用的有椰乳、番茄汁、马铃薯、水果提取物、酵母提取物等。一般使用浓度在10-20％。;二、培养基植物生长调节剂与辅助成分

1、植物生长调节剂

（1）生长素类

常用的生长素有IAA、IBA、NAA、2,4-D等

其活性强弱为2,4-DNAAIBAIAA;

功能：

诱导愈伤组织形成，诱导根的分化,促进细胞分裂、伸长生长。在促进生长方面，根对生长素最敏感。在极低的浓度下，就可促进生长,其次是茎和芽。;（2）细胞分裂素

是腺嘌呤的衍生物，包括6-BA（6－苄基氨基嘌呤）、Kt（kinetin激动素）、ZT（zeatin玉米素）等。其中ZT活性最强，但非常昂贵。

;

常用的是6-BA。细胞分裂素浓度为0.05-10mg/L。

作用：

①诱导芽的分化促进侧芽萌发生长

②促进细胞分裂与扩大

③抑制根的分化

;2、其他物质

（1）琼脂

琼脂只是固化剂。90℃以上成为溶胶，冷却至40℃凝固。

用量：在6-10g/L之间;（2）活性炭

吸附性，通常使用浓度为0.5-10g/L。;（3）抗生物质

种类：抗生物质有青霉素、链霉素、庆大霉素等，用量在5～20mg/L之间。

作用：防止菌类污染。;（4）抗氧化物

种类半胱氨酸，常用50～200mg/L的浓度，其它抗氧化剂有二硫苏糖醇、谷胱甘肽、硫乙醇、及二乙基二硫氨基甲酸酯等。;（5）其它

有玻璃纤维、滤纸桥、海绵等，总的要求是排出的有害物质对培养材料没有影响或影响较小。;三、培养基母液配制

母液是欲配制液的浓缩液，这可保证各物质成分的准确性及配制时的快速移取，并便于低温保藏。一般配成比所需浓度高10--100倍的母液。;要用蒸馏水或重蒸馏水。称量及定容都要准确。各种药品先以少量水让其充分溶解，然后依次混合。母液配好后放入冰箱内低温保存，用时再按比例稀释。;配制方法常有两种：

一是可以将培养基的每种成分配成单一化合物的母液，便于配制不同种类的基本培养基时使用；

二是配成几种不同的混合溶液，一般配成大量元素、微量元素、铁盐、维生素等母液，其中维生素、氨基酸类可