植物组织培养上海农林上海市农业学校植物科学技术系47课件.pptxVIP

植物组织培养;项目四无菌操作;【知识目标】

掌握外植体选择的原则

【技能目标】

学会正确选择外植体;【情感目标】

培养学生无菌意识、创新意识、团队合作意识和生态环保意识

具有任务执行力，规范操作、注意安全

具有科学严谨、实事求是的工作态度;细胞全能型;外植体是指凡是用于离体培养的植物组织器官、组织、细胞或原生质体统称为外植体。

即植物组织培养中的各种接种材料。;从理论上讲，植物细胞都具有全能性，能够再生新植株，任何器官、任何组织、单个细胞和原生质体都可以作为外植体。但实际上，不同品种、不同器官之间的分化能力有巨大差异，培养的难易程度不同。为保证植物组织培养获得成功，选择合适的外植体是非常重要的。;一、培养材料的选择;1、再生能力强的健壮植株

外植体必须有良好的增殖能力，在培养中筛选增殖能力最强的材料。

筛选不同基因型植物所需的特殊培养基。;应在长势健壮且无病虫害的植株上选择正常发育的器官或者组织作为外植体材料。这些器官或者组织的代谢旺盛，再生能力强，接种后更加容易培养成功。;在选取健壮的植物的同时要求外植体来源要丰富。为了建立一个高效而稳定的植物组织离体培养体系，往往需要反复实验，并要求实验结果具有可重复性。因此，就需要外植体材料丰富并容易获得。;2、最佳时期

三点因素：材料、时间和污染因素。

取材料季节和时间，对离体培养至关重要。

处于生长季节，较幼嫩的外植体培养容易。;一般按照植物生长的很适时期取材，即春夏季节取材，材料幼嫩，生理机能旺盛，灭菌也容易，且易培养。

秋冬季取材需要处理。春季取材含菌数少，夏季、雨季、湿热季节取材不容易灭菌成功。;比如：百合在春夏季采集的鳞茎、片，在不加生长素的培养基中，可自由地生长、分化；而其他季节则不能。叶子花的腋芽培养，如果在1月至翌年2月间采集，则腋芽萌发非常迟缓；而在3-8月间采集，萌发的数目多，萌发速度快。;20XX年XX月XX日;而在植物生长末期及休眠期应该采取措施打破休眠后取材，更容??成功。如：花药培养应在花粉发育到单核靠边期取材，这时比较容易形成愈伤组织。;;3、选择优良的种质

优良的种质是成功的第一步。

选择具有明确的种性特征，优良单株、优良无性系、新品种、良种材料作为取出植株。;通常选择具有明确的种性特征，种质纯度高，无杂合现象的植株作为取材植株。同时还应该观察其遗传稳定性、花色、果型、长势等性状表现。;观察其遗传稳定性、花色、果型、长势等性状表现。;观察其遗传稳定性、花色、果型、长势等性状表现。;观察其遗传稳定性、花色、果型、长势等性状表现。;观察其遗传稳定性、花色、果型、长势等性状表现。;观察其遗传稳定性、花色、果型、长势等性状表现。;观察其遗传稳定性、花色、果型、长势等性状表现。;染病的金边瑞香;4、适宜部位，容易消毒

来源于幼年植物的外植体比源于成年树的外植体容易培养。;虽然根据细胞全能性理论上来讲任何组织或者器官都有潜能发育成一个完整的植株，但是从实际操作的过程中会发现不同种类的植株以及同一种类不同取材部位的器官或组织对诱导条件的反应是有很大差异的。;如百合科植物风信子、虎眼万年青等比较容易形成再生小植株，而郁金香就比较困难。百合鳞茎的鳞片外层比内层的再生能力强，下段比中、上段再生能力强。

因此选取材料时要对所培养植物各部位的诱导及分化能力进行比较，从中筛选出合适的、最易表达全能性的部位作为为植体。;同株植物中，较低部位外植体要比上不的外植体容易启动，培养成功可能性大。;植物体的各个部位，如茎尖、茎段、皮层及维管组织、髓细胞、表皮、块茎的贮藏薄壁细胞、花瓣根叶子鳞茎、胚珠和花药等。;茎尖

茎尖是较好的部位，生长速度快，遗传性稳定，又能获得无病毒苗的重要途径。;叶片

叶片能保证多数植物的组织培养不会引起不良变异。

对于培养较困难的植物，可以通过子叶或下胚轴来建立起组织培养再生体系。;节间部位

大部分果树和花卉等植物，新梢的节间部是组织培养的较好材料。新梢节间部位不仅消毒容易，而且脱分化和再分化能力较强，因此是常用组织培养材料。;叶和叶柄

叶片和叶柄取材容易，新出的叶片杂菌较少，实验操作方便，是植物组织培养中常用的材料。尤其是近年在植物的遗传转化中，以叶片为试验材料的报道很多。;鳞片

水仙、百合、葱、蒜、风信子等鳞茎类植物常以鳞片为材料。;5、材料的生