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人羊膜间充质干细胞与上皮细胞移植对帕金森病模型大鼠治疗效应的比较研究

一、引言

1.1研究背景

帕金森病（Parkinson’sdisease，PD）作为一种常见的中枢神经系统退行性疾病，其发病率随着全球人口老龄化的加剧而逐年上升。据统计，在65岁以上人群中，PD的发病率约为1%-2%，且年龄越大，患病风险越高。PD主要病理特征为中脑黑质多巴胺能神经元进行性退变和死亡，导致纹状体多巴胺水平显著降低，进而引发一系列运动和非运动症状。运动症状包括静止性震颤、运动迟缓、肌强直和姿势平衡障碍等，严重影响患者的日常活动能力，如行走、穿衣、进食等；非运动症状则涵盖便秘、嗅觉障碍、睡眠障碍、自主神经功能障碍及认知障碍等多个方面，极大地降低了患者的生活质量。随着病情的进展，患者逐渐丧失自理能力，给家庭和社会带来沉重的负担。

目前，PD的治疗方法主要包括药物治疗和手术治疗。药物治疗如左旋多巴等，虽能在一定程度上缓解症状，但长期使用会出现疗效减退、异动症等副作用；手术治疗如深部脑刺激术（DBS），虽可改善运动症状，但存在手术风险和费用高昂等问题，且并非适用于所有患者。这些传统治疗方法无法阻止疾病的进展，只能暂时缓解症状，因此，探索一种更有效的治疗方法迫在眉睫。

细胞移植疗法作为一种新兴的治疗策略，为PD的治疗带来了新的希望。其原理是通过移植具有分化为多巴胺能神经元潜力的细胞，补充受损的多巴胺能神经元，从而恢复纹状体多巴胺水平，改善PD症状。人羊膜干细胞作为一种具有独特生物学特性的干细胞，在PD治疗领域展现出巨大的潜力，引起了广泛的关注和研究。

1.2人羊膜干细胞概述

人羊膜干细胞（HumanAmnioticStemCells,hASCs）是来源于胎盘羊膜的一类多功能干细胞，主要包括人羊膜上皮干细胞（humanamnioticepithelialcells,hAECs）和人羊膜间充质干细胞（humanamnioticmesenchymalstemcells,hAMSCs）。

hAECs来源于胎盘靠近胎儿一侧的羊膜组织上皮层，是胚胎发育早期的产物，保留了胚胎干细胞的部分特性。它们具有多能干性，能够分化为三个胚层的各种细胞类型，如神经元、心肌细胞、肝细胞等。hAECs缺乏端粒酶，体外扩增能力有限，这使其在一定程度上避免了致瘤性问题。此外，hAECs还具有免疫调节和抗炎特性，能够分泌多种神经营养因子和细胞因子，如脑源性神经营养因子（BDNF）、神经生长因子（NGF）等，这些因子在神经损伤修复和再生中发挥着重要作用。

hAMSCs同样来源于胎盘靠近胎儿一侧的羊膜组织，属于间充质干细胞的一种。它们具有较强的增殖能力和自我更新能力，在体外可稳定扩增多代。hAMSCs也具有多向分化潜能，可以分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等多种细胞类型。与hAECs类似，hAMSCs也缺乏免疫原性和致瘤性，适合用于细胞移植治疗。同时，hAMSCs能够分泌多种生长因子和细胞因子，如血管内皮生长因子（VEGF）、转化生长因子-β（TGF-β）等，这些因子在促进组织修复和再生、调节免疫反应等方面发挥着重要作用。

在PD治疗研究中，hAECs可通过分化为多巴胺能神经元，补充受损的神经元，同时分泌神经营养因子，促进内源性神经干细胞的增殖和分化，从而改善PD症状。已有研究表明，将hAECs移植到PD模型大鼠脑内，可显著改善大鼠的旋转行为，提高纹状体多巴胺水平。hAMSCs则主要通过旁分泌作用，分泌多种神经营养因子和细胞因子，促进多巴胺能神经元的存活和修复，抑制炎症反应，调节免疫功能，为受损神经组织的修复提供良好的微环境。研究发现，过表达核相关受体因子1（Nurr1）的hAMSCs移植到PD大鼠体内，能够改善大鼠的病理症状，提高黑质纹状体多巴胺转运体（DAT）及酪氨酸羟化酶（TH）含量，减少细胞凋亡。

1.3研究目的和意义

本研究旨在比较人羊膜间充质干细胞和人羊膜上皮细胞移植治疗帕金森病模型大鼠的效应，包括对行为学、神经递质水平、神经病理变化等方面的影响，明确两种细胞在治疗PD中的优势和不足。从理论意义来看，深入了解两种细胞的治疗机制和效果差异，有助于进一步揭示人羊膜干细胞治疗PD的作用原理，丰富干细胞治疗神经系统疾病的理论体系，为后续的研究提供重要的理论依据。从实践意义而言，本研究结果将为PD的细胞治疗提供更科学、有效的细胞选择和治疗方案，为临床转化应用奠定基础，有望改善PD患者的治疗效果和生活质量，减轻家庭和社会的负担。

二、材料与方法

2.1实验材料

2.1.1实验动物

选用健康成年雄性Sprague-Dawle