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病理科病理切片处理标准流程

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目录

CATALOGUE

02

标本固定处理

03

脱水透明浸蜡

04

包埋与切片

05

染色与标记

06

存档与管理

01

标本接收与登记

01

标本接收与登记

PART

样本接收核对流程

样本完整性检查

接收样本时需严格检查容器密封性、样本量是否充足，并核对申请单与样本标识是否一致，确保无渗漏、污染或标识模糊等问题。

信息登记标准步骤

双人录入复核

紧急标本标记

条码系统关联

采用电子系统录入标本信息时需由两名工作人员分别完成初录与复核，确保病理号、标本类型、取材部位等数据完全一致。

为每例标本生成唯一电子条码，将病理信息与后续切片、染色、诊断环节自动关联，实现全流程可追溯管理。

对术中快速冰冻等紧急标本需在登记系统中标注红色预警标识，并同步通知病理技师优先处理。

防水防脱落标签

每个标本容器至少粘贴两张包含病理号、患者姓名的标签，呈对角分布以防单侧磨损导致信息丢失。

双重标识原则

冷冻标本特殊处理

针对需低温保存的标本，须使用低温胶粘标签，粘贴后加压10秒确保在-80℃环境下仍保持粘性。

选用专业病理级标签纸，要求耐受福尔马林、酒精等试剂浸泡，粘贴时需完全覆盖容器原标签且避开瓶口螺纹区域。

标签粘贴规范

02

标本固定处理

PART

作为常规固定剂，其渗透性强且能有效保存组织形态，适用于大多数病理标本，需确保浓度控制在4%-10%范围内以避免过度硬化或固定不足。

固定剂选择与应用

中性缓冲福尔马林

适用于特殊染色或分子检测的标本，如糖原染色，需注意高浓度乙醇可能导致组织收缩，需与其他试剂混合使用以平衡效果。

乙醇类固定剂

针对特定组织类型（如睾丸、眼球）设计，含苦味酸成分可增强结缔组织染色对比度，但需严格把控使用量以避免组织脆化。

特殊固定剂（如Bouin液）

固定时间控制标准

01

02

03

常规组织固定时长

实体器官标本需浸泡6-12小时，确保固定液充分渗透至组织核心，过短易导致中心区域固定不良，过长则可能引起组织过度硬化。

微小标本（如活检组织）

因体积较小，固定时间可缩短至2-4小时，但仍需根据标本厚度调整，避免因时间不足影响后续脱水包埋质量。

大体积标本（如全器官）

需切开后固定或灌注固定液，总时长不超过24小时，并定期更换新鲜固定液以维持有效浓度。

环境条件要求

温度控制

固定过程应在室温（20-25℃）下进行，避免高温加速固定剂挥发或低温延缓渗透速率，导致固定不均。

通风与安全防护

操作区域需配备通风橱，尤其处理福尔马林等挥发性试剂时，需佩戴防护手套、口罩及护目镜以减少职业暴露风险。

容器密封性

标本容器必须密闭防漏，防止固定剂挥发或污染环境，同时避免标本干燥变形影响后续切片质量。

03

脱水透明浸蜡

PART

脱水梯度设定

梯度乙醇浓度选择

采用从低到高的乙醇梯度（如70%、80%、95%、100%），逐步置换组织中的水分，避免因浓度骤变导致细胞收缩或变形。每级乙醇浸泡时间需根据组织类型和厚度调整，通常为1-2小时。

温度与搅拌优化

脱水过程应在恒温环境下进行（建议20-25℃），并配合缓慢机械搅拌以提升试剂渗透效率，但需避免剧烈搅拌导致组织损伤。

脱水时间控制

脂肪含量高的组织需延长脱水时间，而疏松组织可适当缩短；脱水不足会导致后续透明不彻底，过度脱水则可能引起组织脆化。

传统二甲苯透明需分两阶段进行（各30-60分钟），但可选用环保型透明剂（如柠檬烯）降低毒性，透明终点以组织呈半透明状且无白色云雾为判断标准。

二甲苯替代方案

定期检测透明剂中水分含量（如加入无水硫酸铜观察变色），水分超标会导致透明效果下降，需及时更换试剂。

透明剂纯度监测

钙化组织需先进行脱钙处理再透明；含血丰富组织可延长透明时间至2小时以上，确保彻底清除残留水分。

特殊组织处理

透明化学处理

浸蜡操作规范

石蜡熔点选择

常规病理切片采用56-58℃低熔点石蜡，而大块组织或特殊需求可选用60-62℃高熔点石蜡，浸蜡前需将石蜡在恒温箱中完全熔融并过滤杂质。

浸蜡时长与次数

标准流程包括3次浸蜡（每次1-2小时），首次浸蜡需在真空条件下进行以排除气泡，后续浸蜡可常压操作确保石蜡充分渗透。

温度波动控制

浸蜡过程中蜡缸温度波动需控制在±1℃范围内，温度过高会导致组织硬化，过低则影响石蜡渗透性，建议使用数字温控系统实时监测。

04

包埋与切片

PART

1

2

3

石蜡包埋技术

组织脱水与透明化处理

组织需经过梯度酒精脱水（70%-100%）及二甲苯透明化处理，确保石蜡充分浸润，避免切片时组织碎裂或空洞。脱水时间需根据组织类型（如脂肪组织需延长）精确控制。

石蜡浸渍与包埋模具选择

采用熔点为56-58℃的高纯度石蜡，浸渍温度控制在60-65℃，时间不少于4小时。包埋模具需根据组织大小选择，确保组