流式细胞术在周期与凋亡中的应用 (2).pptVIP

流式细胞术在周期与凋亡中的应用 (2).ppt

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第1页,共34页,星期日,2025年,2月5日目录010203工作原理周期应用凋亡应用04案例分析第2页,共34页,星期日,2025年,2月5日Publishedjournal

(scipapers1000)第3页,共34页,星期日,2025年,2月5日第4页,共34页,星期日,2025年,2月5日概念流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来第5页,共34页,星期日,2025年,2月5日仪器基本组成流动室和液流系统流动室 鞘液SHEATH激光源和光学系统光源滤片光电管和检测系统光电倍增管PMT计算机和分析系统计算机第6页,共34页,星期日,2025年,2月5日液流系统

InjectorTipFluorescencesignalsFocusedlaserbeamSheathfluid流动室第7页,共34页,星期日,2025年,2月5日光路图Air-cooledArgonIonLaserBeamShapingLensesHighSensitivityQuartzFlowCellForwardScatterDetectorSideScatterDetector525BPFL1(FITC)575BPFL2(PE)620BPFL3(ECD)675BPFL4(PC5)488DL488BK550DL600DL645DL流动室第8页,共34页,星期日,2025年,2月5日激光配置488nm氩离子激光器633nm氦氖激光器大功率紫外激光器第9页,共34页,星期日,2025年,2月5日光路-滤片特性长通滤片–允许长于设定波长的光通过短通滤片–允许短于设定波长的光通过带通滤片–允许一定带宽的波长通过630nmBandPassFilterWhiteLightSource第10页,共34页,星期日,2025年,2月5日光信号收集光信号分离,导向,各探测通道PMT接收并转化为电信号。二色镜123带通滤波片光电倍增管激光束细胞收集透镜前向散射光侧向散射光,荧光第11页,共34页,星期日,2025年,2月5日数据处理FSCSSCFL1FL2FL3脉冲处理,模数转换光信号电信号记录数据,显示结果(面积,峰高,宽度)第12页,共34页,星期日,2025年,2月5日颗粒度细胞大小参数非荧光信号第13页,共34页,星期日,2025年,2月5日FL1–FITC,GFP…(PMT2)FL2–PE(PMT3)FL3–ECD,PI…(PMT4)FL4–PC5,APC…(PMT5)荧光信号第14页,共34页,星期日,2025年,2月5日激光器第15页,共34页,星期日,2025年,2月5日周期应用第16页,共34页,星期日,2025年,2月5日第17页,共34页,星期日,2025年,2月5日单参数直方图第18页,共34页,星期日,2025年,2月5日DNA细胞周期分析细胞周期G2MG0G1s2004006008001000G0G1sG2MDNA分析DNA含量细胞数量2N4N

第19页,共34页,星期日,2025年,2月5日产品列表第20页,共34页,星期日,2025年,2月5日研究领域第21页,共34页,星期日,2025年,2月5日分析软件Modfit:/products/mflt/Flowjo:/v764/en/cellcycle.htmlFCSEXPRESS:/site/multicycleplugin.shtml第22页,共34页,星期日,2025年,2月5日凋亡研究在G0/G1峰前出现一个亚二倍体峰,即凋亡峰。检测调亡,可进行抗肿瘤药物研究和某些因素对细胞的损伤机理的研究。第23页,共34页,星期日,2025年,2月5日第24页,共34页,星期日,2025年,2月5日细胞凋亡第25页,共34页,星期日,2025年,2月5日凋亡检测-每一步都有检测试剂盒第26页,共34页,星期日,2025年,2月5日磷脂结合蛋白V(AnnexinV)是一种钙依赖

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