褪黑素对Aβ25 - 35诱导原代脑皮层神经元损伤的保护机制探究.docxVIP

褪黑素对Aβ25-35诱导原代脑皮层神经元损伤的保护机制探究

一、引言

1.1研究背景与意义

阿尔茨海默病（Alzheimersdisease，AD），常被形容为“大脑橡皮擦”，是一种复杂且极具破坏性的神经退行性疾病，严重威胁着老年人的健康和生活质量。据《世界阿尔茨海默病2018年报告》显示，每3秒钟，全球就会新增一位痴呆症患者，其中约60%-70%为AD患者。在中国，AD患者数量庞大，目前约有1000万，预计到21世纪中叶，全球痴呆患者将达到1.52亿，AD患者数量也将随之大幅增长。

AD患者的大脑中，存在两大典型病理特征：淀粉样蛋白-β（amyloid-β，Aβ）斑块堆积和细胞内tau蛋白缠结。这些病理变化会引发一系列级联反应，包括氧化应激、线粒体功能障碍、脂质过氧化等，最终导致神经元死亡，患者的认知功能和记忆力也随之逐渐丧失。当前，针对AD的治疗手段十分有限，现有药物大多只能在一定程度上缓解症状，如胆碱酯酶抑制剂、美金刚等，无法从根本上阻止疾病的进展。新上市的靶向药，如仑卡奈单抗和多奈单抗，虽对轻症患者有一定疗效，但价格昂贵，年治疗费用高达20万元左右，且未纳入医保，这使得大多数患者难以承受。

在众多研究方向中，Aβ肽因其在AD发病机制中的核心作用，成为了研究的重点。Aβ25-35是Aβ肽链中位于第25-35个氨基酸位点的基因片段，被证实是引起神经毒性的主要活性部位。它能够诱导神经元细胞的凋亡和死亡，通过激活线粒体功能障碍、氧化应激、炎症反应以及细胞骨架的破坏等多种细胞毒性途径，对神经元造成严重损伤。研究Aβ25-35诱导的神经元损伤机制，对于深入理解AD的发病过程具有重要意义。

褪黑素（Melatonin）作为一种由松果体分泌的强大抗氧化剂，近年来在AD研究领域逐渐受到关注。它不仅能调节昼夜节律，改善睡眠质量，还具备抗炎、促进神经生成、抗焦虑和神经保护等多种功效。有研究发现，褪黑素可以增强细胞代谢和活力，降低活性氧（ROS）水平和脂质过氧化，有效减轻Aβ诱导的神经毒性。此外，褪黑素还可在Aβ介导的退行性认知障碍疾病中通过改善脑部微血管的异常病变，从而改善AD的认知功能，该作用可能是通过调节血管内皮生长因子相关信号通路实现。然而，褪黑素对Aβ25-35诱导的原代脑皮层神经元损伤的保护作用及具体机制，仍有待进一步深入研究。

本研究旨在明确褪黑素对Aβ25-35诱导原代脑皮层神经元损伤是否具有保护作用，并深入探究其潜在的作用机制。这不仅有助于我们更深入地理解AD的发病机制，还可能为AD的治疗提供新的靶点和治疗策略，具有重要的理论意义和临床应用价值。

1.2国内外研究现状

在国外，对于Aβ25-35诱导神经元损伤的研究较为深入。诸多研究表明，Aβ25-35能够诱导神经元产生氧化应激反应，使细胞内活性氧（ROS）水平显著升高，从而破坏细胞内的氧化还原平衡，导致神经元损伤。Aβ25-35还可引发线粒体功能障碍，影响细胞的能量代谢，使ATP生成减少，最终导致神经元凋亡。在针对褪黑素的研究中，国外学者发现褪黑素可以通过调节细胞内的抗氧化酶系统，如超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）等，增强细胞的抗氧化能力，从而减轻Aβ25-35诱导的氧化应激损伤。褪黑素还能够抑制炎症因子的释放，如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）等，减轻炎症反应对神经元的损伤。

国内的研究也取得了一定的进展。有研究运用MTT法检测发现，Aβ25-35可使原代培养的海马神经元和隔区神经元的存活率明显下降，通过电镜观察到神经元发生凋亡的形态学改变。在探讨褪黑素的保护作用机制方面，国内学者发现褪黑素可能通过激活某些细胞信号通路，如PI3K/AKT信号通路，促进神经元的存活和抗凋亡能力。褪黑素还可通过调节钙离子稳态，抑制Aβ25-35诱导的细胞内钙离子超载，从而减轻神经元损伤。

然而，当前研究仍存在一些不足之处。一方面，对于褪黑素保护作用的分子机制尚未完全明确，其在细胞内的具体作用靶点和信号传导途径仍有待进一步深入探究。另一方面，现有的研究大多集中在体外细胞实验和动物模型上，缺乏临床研究的验证，这使得褪黑素在AD治疗中的实际应用受到一定限制。

1.3研究目的与内容

本研究的主要目的是明确褪黑素对Aβ25-35诱导原代脑皮层神经元损伤的保护作用，并深入探讨其作用机制，为阿尔茨海默病的治疗提供新的理论依据和潜在治疗策略。

具体研究内容如下：

原代脑皮层神经元的培养与鉴定：采用合适的方法进行原代脑皮层神经元的培养，运用免疫荧光染色等技术对培养的神经元进行鉴定，确