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杂交构树BpWOX转录因子基因克隆及特性的深度解析与应用探索

一、引言

1.1研究背景

转录因子在植物的生命活动中扮演着举足轻重的角色，对植物的生长发育进程以及抗逆性的形成有着关键的调控作用。它们能够特异性地识别并结合基因启动子区域的顺式作用元件，进而调控基因转录的起始、延伸和终止等过程，以此精准地控制植物基因组中大量基因的表达。在植物生长发育的各个阶段，例如种子的萌发、根系的形成、花器官的发育以及果实的成熟等，转录因子都发挥着不可或缺的作用。就像AP2家族的转录因子在植物胚胎发育和器官分化过程中，通过调节特定的基因表达程序，来控制细胞的分化，从而对植物的形态建成产生重要影响。

在面对各种复杂多变的环境压力时，如高温、低温、干旱和盐渍等非生物胁迫，以及害虫和病原体等生物胁迫，植物进化出了一套复杂的应对策略，而转录因子正是这一策略中的核心调节因子。以CBF转录因子为例，在低温应激条件下，它能够诱导一系列特定基因的表达，从而提高植物的抗寒性，帮助植物抵御低温的伤害；ERFs类转录因子则可以直接与启动子结合，转录激活功能基因的表达，进而调节植株的抗性应答，使植物能够更好地适应逆境环境。

WOX转录因子家族作为植物所特有的一类转录因子家族，在植物的生长发育和进化过程中占据着极为重要的地位。该家族基因最早从绿藻单起源，根据系统进化关系，可以划分为远古支、中间支和WUS支这3个分支。其特征序列是含有一个由65个氨基酸残基组成的同源异型结构域，这一结构域能够与特异性的DNA序列结合，从而在转录水平上调控靶基因的表达。已有大量研究表明，WOX家族基因在植物发育的关键时期，如胚的形成、干细胞稳定性的维持以及器官的形成过程中，都发挥着至关重要的调控作用。这些功能的实现，与它们能够促进细胞分裂，或者阻止未成熟细胞的提前分化密切相关。

杂交构树作为一种具有重要经济价值和生态价值的植物，在生态修复、饲料生产、造纸等多个领域都展现出了巨大的应用潜力。然而，目前对于杂交构树生长发育和抗逆性的分子机制研究还相对薄弱。深入研究杂交构树中的WOX转录因子基因，不仅能够揭示其在杂交构树生长发育和抗逆过程中的调控机制，为杂交构树的遗传改良提供坚实的理论基础，还能进一步丰富植物转录因子的研究内容，推动植物分子生物学的发展。

1.2杂交构树概述

杂交构树（Broussonetiapapyrifera）是中国科学院植物研究所运用现代农业育种技术，历经十几年的潜心研究，通过太空搭载育种、杂交选育等手段培育而成的优质树种。其培育过程综合考虑了生长特性、生态学特性和绿化园艺性状等多方面因素，选育出具高耐盐、生长快、产量高、品种好的构树材料和株系。该树种具有速生性、丰年性、耐砍伐等特点，年均株高4-6m，粗4-6cm，当年栽植即可当年收获；每年亩产韧皮纤维200KG，木材2000KG，构枝叶1500KG，北京地区年亩产5吨以上，海南地区年产达15吨以上；且一年栽植，可连年收获，收获年限长达20年以上。

杂交构树具有极高的应用价值。在饲料领域，其树叶和全株的粗蛋白含量高，富含氨基酸和维生素等营养成分，是陆地动物和鱼类的优质饲料，可部分替代豆粕、鱼粉，降低养殖成本，缓解国内蛋白饲料对外依赖。在生态修复方面，杂交构树根系发达，耐贫瘠、抗逆性强，适合在石漠化、沙化、盐碱地等边际土地上种植，能够有效固土防沙，同时其速生特性使其固碳效率高，每亩年固碳量可达3-5吨，助力实现碳中和目标。此外，杂交构树还是良好的工业原料，其树皮纤维长、质地坚韧，是生产高档纸浆（如宣纸、钞票纸）的优质原料，树干和枝条可用于生物质发电、燃料乙醇生产；树皮、根皮含黄酮类、多糖等活性物质，具有抗氧化、抗炎作用，可提取制药原料，粉碎后的枝条还可作为香菇、木耳等食用菌的栽培基料。

1.3WOX转录因子家族

WOX转录因子家族的结构特点鲜明，其特征序列为含有一个由65个氨基酸残基组成的同源异型结构域。与典型的同源异型结构域相比，WOX转录因子家族的同源异型结构域多出了5个氨基酸（WUS多出6个氨基酸）。该家族根据系统进化关系可分为3支：远古支包括WOX10、WOX13、WOX14；WUS支包含WUS和WOX1-7；WOX8、WOX9、WOX11和WOX12则处于两者之间的中间支。结构上，WUS进化分支的WOX蛋白除了含有典型的HD结构域外，其下游还包括WUS-box结构域。

在功能方面，WOX家族基因参与了植物生长发育的多个关键过程。在胚的形成过程中，WOX基因发挥着重要的调控作用，影响着胚胎的早期发育和细胞分化。在干细胞稳定性的维持上，WOX基因能