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DNA粗提取和鉴定课件

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目录

01

DNA粗提取原理

02

DNA粗提取实验材料

03

DNA粗提取实验步骤

04

DNA鉴定技术

05

实验注意事项

06

实验结果与讨论

DNA粗提取原理

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01

细胞结构概述

DNA功能作用

遗传信息载体，指导蛋白质合成

DNA结构特点

双螺旋结构，含A、T、C、G碱基

01

02

DNA提取方法

利用DNA溶解度差异，高盐溶解、低盐析出，实现DNA提取。

高盐低盐沉淀

DNA不溶于酒精，用冷酒精沉淀DNA，去除杂质。

酒精沉淀法

提取过程中的关键步骤

利用NaCl溶液浓度变化，使DNA溶解度降低析出。

溶解度差异

DNA不溶于冷酒精，过滤保留DNA。

酒精沉淀

DNA粗提取实验材料

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02

实验所需试剂

鸡血与抗凝剂混合制备。

鸡血细胞液

不同浓度，用于DNA析出与溶解。

氯化钠溶液

鉴定DNA，沸水浴后变蓝。

二苯胺试剂

实验所需器材

鸡血细胞悬液，离心机等。

鸡血细胞材料

菜花，研磨过滤器，研磨棒等。

菜花研磨器材

通用实验器材

试管，移液器，电子天平等。

实验材料的准备

选择富含DNA的生物材料，确保材料新鲜且易于破碎。

选材原则

如鸡血细胞、动植物组织等，需预处理以去除杂质。

常用材料

DNA粗提取实验步骤

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03

细胞裂解

细胞裂解步骤

破坏细胞释DNA

常用裂解方法

机械酶解结合

核酸沉淀

溶液冷却后，DNA会析出形成白色沉淀。

冷却析出

通过离心操作，将DNA沉淀收集到管底。

离心收集

DNA纯化

通过离心、过滤等方法去除溶液中的蛋白质、多糖等杂质。

去除杂质

使用乙醇或异丙醇等有机溶剂沉淀DNA，使其从溶液中析出。

沉淀DNA

DNA鉴定技术

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04

电泳技术原理

01

DNA带电迁移

DNA带负电，电场中向正极迁移，片段大小影响速率。

02

凝胶分子筛效应

凝胶孔径筛分DNA，实现不同片段的分离。

电泳操作步骤

配制琼脂糖凝胶，加热熔化后冷却凝固。

制备凝胶

电泳后，凝胶成像仪观察并与Marker比较DNA片段大小。

观察结果

DNA样品加Loading-buffer后加样，接通电源进行电泳。

加样电泳

01

02

03

结果分析与解读

根据电泳条带位置判断DNA片段大小。

电泳图分析

通过紫外吸收峰值确定DNA浓度与纯度。

紫外吸收检测

实验注意事项

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05

安全操作规程

实验时需穿戴实验服、手套和护目镜，以防化学品溅到皮肤或眼睛。

穿戴防护装备

01

严格按照设备说明书操作离心机、移液器等设备，避免操作不当引发事故。

规范操作设备

02

实验误差控制

01

规范操作

严格按照实验步骤操作，减少操作不当带来的误差。

02

器材校准

确保实验器材干净且准确校准，避免器材问题导致的误差。

结果的可靠性评估

试剂质量检查

使用高质量试剂，避免试剂问题导致的实验结果偏差。

操作规范性

确保实验步骤准确，减少操作误差，提高结果可靠性。

01

02

实验结果与讨论

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06

实验结果展示

展示电泳图，分析DNA条带位置与亮度。

条带观察

通过光度计测定DNA浓度，评估提取效率。

浓度测定

结果分析

分析电泳图上的DNA条带，判断提取效果。

条带观察

通过OD值检测DNA纯度，确保提取质量。

纯度检测

实验改进方向

采用先进设备，提升实验精度与安全性。

设备升级建议

探索更环保、高效的提取试剂，降低成本。

试剂优化选择

简化操作流程，提高DNA提取效率与纯度。

优化提取步骤

谢谢

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