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生物医药腺病毒技术员考试试卷与答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.腺病毒的核酸类型是（）

A.单链DNAB.双链DNAC.单链RNAD.双链RNA

2.培养腺病毒常用的细胞系是（）

A.HEK293B.HeLaC.CHOD.NIH3T3

3.腺病毒的直径约为（）

A.50nmB.70nmC.90nmD.110nm

4.以下哪种方法不能用于腺病毒的检测（）

A.ELISAB.荧光定量PCRC.WesternblotD.血细胞凝集试验

5.腺病毒感染人体后主要引起（）

A.呼吸道感染B.消化道感染C.泌尿系统感染D.血液系统感染

6.构建重组腺病毒载体时，常用的工具酶不包括（）

A.限制性内切酶B.DNA连接酶C.逆转录酶D.Taq酶

7.腺病毒疫苗的制备过程中，不涉及的步骤是（）

A.病毒培养B.病毒灭活C.病毒纯化D.病毒基因编辑

8.腺病毒载体基因治疗的优点不包括（）

A.容量大B.免疫原性低C.宿主范围广D.安全性高

9.保存腺病毒毒株的常用温度是（）

A.-20℃B.-80℃C.4℃D.37℃

10.以下哪种细胞对腺病毒不敏感（）

A.上皮细胞B.淋巴细胞C.神经元细胞D.红细胞

二、多项选择题（每题2分，共20分）

1.腺病毒的结构组成包括（）

A.衣壳蛋白B.核心蛋白C.核酸D.包膜

2.腺病毒的传播途径有（）

A.空气飞沫传播B.接触传播C.粪口传播D.血液传播

3.用于腺病毒培养的培养基成分包括（）

A.氨基酸B.维生素C.无机盐D.血清

4.腺病毒检测技术有（）

A.电子显微镜观察B.病毒分离培养C.血清学检测D.分子生物学检测

5.构建重组腺病毒载体的步骤包括（）

A.目的基因获取B.载体构建C.病毒包装D.病毒纯化

6.腺病毒基因治疗面临的挑战有（）

A.免疫反应B.靶向性不足C.病毒载体安全性D.成本较高

7.腺病毒疫苗的类型有（）

A.灭活疫苗B.减毒活疫苗C.重组蛋白疫苗D.核酸疫苗

8.影响腺病毒感染效率的因素有（）

A.细胞类型B.病毒滴度C.培养条件D.病毒传代次数

9.腺病毒在生物医药领域的应用包括（）

A.基因治疗B.疫苗研发C.药物载体D.细胞治疗

10.腺病毒的基因表达调控元件有（）

A.启动子B.增强子C.终止子D.内含子

三、判断题（每题2分，共20分）

1.腺病毒是一种有包膜的病毒。（）

2.所有腺病毒都能引起人类疾病。（）

3.腺病毒可以在无血清培养基中生长。（）

4.荧光定量PCR可以准确测定腺病毒的感染滴度。（）

5.重组腺病毒载体构建成功后无需进行鉴定。（）

6.腺病毒疫苗接种后不会产生不良反应。（）

7.腺病毒基因治疗可以治疗所有遗传疾病。（）

8.腺病毒在56℃30分钟可被灭活。（）

9.不同血清型的腺病毒生物学特性相同。（）

10.腺病毒培养过程中不需要无菌操作。（）

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述腺病毒作为基因治疗载体的优势。

答案：腺病毒载体容量大，可容纳较大片段外源基因；宿主范围广，能感染多种类型细胞；免疫原性相对较低；安全性较好，一般不整合到宿主基因组。

2.简述腺病毒的培养流程。

答案：选择合适细胞系（如HEK293细胞），准备含血清等营养成分的培养基，复苏细胞后接种培养，待细胞状态良好时接种腺病毒，在适宜条件下培养，观察细胞病变，收获病毒进行后续处理。

3.简述腺病毒检测的常用方法及原理。

答案：ELISA利用抗原抗体特异性结合检测腺病毒抗原；荧光定量PCR通过扩增腺病毒核酸来定量；病毒分离培养是将样本接种细胞观察病变判断有无病毒；血清学检测通过检测抗体判断是否感染过腺病毒。

4.简述重组腺病毒载体构建的关键要点。

答案：准确获取目的基因，选择合适载体，用限制性内切酶和连接酶构建重组载体，导入包装细胞进行病毒包装，对构建产物进行鉴定以确保正确。

五、讨论题（每题5分，共20分）

1.讨论腺病毒疫苗研发中如何平衡免疫原性和安全性。

答案：研发时要选择合适毒株，通过减毒或灭活等手段降低安全性风险；同时，调整疫苗制备工艺和佐剂添加，提高免疫原性，刺激机体产生有效免疫反应，保障接种者安全和疫苗效果。

2.讨论腺病毒基因治疗在肿瘤治疗中的应用前景与挑战。

答案：前景在于可携带治疗基因靶向肿瘤细胞，调节肿瘤微环境。挑战有免疫反应影响疗效和安全性，靶向性不够精准，病毒载体可能引发不良反应，且成本高限制广泛应用。

3.讨论腺病毒培养过程中细胞污染对结果的影响及预防措施。

答案：细胞污染会干扰腺病毒生长，导致病毒产量低、纯度差，甚至实验失败。预防措施包括严格无菌操作，对培养基、器材等彻底灭菌，定期检测细胞，建立良好细胞库并防止交叉污染。

4.讨论腺病毒检测新技术的发展对生物医药行业的意义。

答案：新技术能提高检测灵敏度、特异性和效率，有助于快速诊断疾