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生物显微镜标准操作规程手册

一、总则

本手册旨在规范生物显微镜的操作流程，确保实验结果的准确性、可重复性，保护仪器设备免受损坏，并保障操作人员的安全。本规程适用于所有使用本实验室生物显微镜的科研人员、教学人员及学生。请在使用显微镜前仔细阅读并严格遵守本规程。

二、操作前准备

2.1操作环境要求

1.显微镜应放置在平稳、坚固、干燥、洁净的实验台上，远离震动源、水源、火源及腐蚀性气体。

2.操作区域光线应适宜，避免阳光直射显微镜镜头，以免影响观察效果及损伤仪器内部元件。必要时可使用窗帘或遮光板调节。

3.实验台应整洁，除实验必需物品外，不应放置其他杂物，以避免操作中碰撞显微镜。

2.2操作人员准备

1.操作人员应穿着实验服，长发者需将头发束起，必要时佩戴防护眼镜及一次性手套，尤其是在处理具有潜在生物危害的样品时。

2.操作人员应熟悉所用显微镜的基本构造、性能及操作方法。初次使用者必须在指导人员的指导下进行操作，严禁擅自操作。

2.3仪器检查

1.外观检查：检查显微镜各部件是否完好，有无松动、损坏或污渍。镜身、镜头是否清洁。

2.电源检查：对于电动显微镜或带有内置光源的显微镜，检查电源线是否完好，插头是否牢固。

3.镜头检查：检查物镜、目镜是否安装正确、洁净，镜头表面有无霉斑、划痕或油渍。如有污染物，应先按照本规程清洁步骤进行清洁。

4.机械部分检查：轻轻转动粗准焦螺旋和细准焦螺旋，感觉是否顺畅，有无卡顿或异常声响。检查载物台移动是否平稳，固定装置是否有效。

2.4实验材料准备

1.准备好待观察的样品玻片，确保样品制备符合标准，标签清晰。

2.准备好干净的载玻片、盖玻片（如需临时制片）、吸水纸、擦镜纸等辅助材料。

3.根据观察需要，准备相应的染色剂或其他试剂（如需）。

三、显微镜操作步骤

3.1开机与光源调节

1.连接电源：如使用外接电源的显微镜，将电源线插头插入合适的电源插座。

2.打开电源：打开显微镜主电源开关，然后打开光源开关。对于可调光光源，先将亮度调至最低，然后根据需要缓慢调至合适亮度，避免强光瞬间刺激眼睛。

3.光圈与聚光镜调节：根据样品特性和物镜倍数，初步调节聚光镜的高度和光圈大小。一般原则是：低倍镜观察时，聚光镜适当降低，光圈适当缩小；高倍镜观察时，聚光镜升至最高（与载物台齐平或略低），光圈适当开大。

3.2样品装载

1.放置样品：将制备好的样品玻片（有样品的一面朝上）平稳地放在载物台上，用载物台夹或压片夹将玻片固定牢固，防止观察时玻片滑动。

2.样品定位：通过移动手轮或调节旋钮，将样品需要观察的区域移至载物台通光孔的中心位置。

3.3低倍物镜观察

1.选择物镜：旋转物镜转换器，将最低倍物镜（通常为4×或10×）对准载物台通光孔中心，听到“咔哒”声表示物镜已卡紧到位。

2.调焦：

*双眼从目镜上方观察（或单眼观察，另一眼睁开以便记录），同时缓慢转动粗准焦螺旋，使载物台缓慢上升（或镜筒缓慢下降），直至目镜中出现模糊的图像。注意：此过程中，眼睛应注视目镜，同时操作粗准焦螺旋，动作要缓慢，避免物镜镜头触碰玻片，损坏镜头或样品。

*转动细准焦螺旋，使图像清晰。

3.视野调节：观察视野亮度是否适宜，可通过调节光源亮度旋钮或聚光镜光圈进行调整，直至视野明亮、均匀，无眩光。

4.寻找目标：通过移动载物台，在低倍镜下仔细观察，找到需要进一步放大观察的目标区域，并将其移至视野中心。

3.4高倍物镜观察

1.转换物镜：在低倍镜下找到清晰目标并将其置于视野中心后，直接旋转物镜转换器，将高倍物镜（如40×）对准通光孔。注意转换时动作要轻缓，避免碰撞。部分显微镜的高倍物镜带有弹簧缓冲装置，若不慎触碰玻片，可起到一定保护作用，但仍需小心操作。

2.微调焦距：转换至高倍镜后，图像可能会变得模糊，此时严禁使用粗准焦螺旋，只需轻轻转动细准焦螺旋，即可获得清晰的图像。

3.亮度与对比度调节：高倍镜下视野通常会变暗，可适当增大光圈或提高光源亮度，必要时微调聚光镜高度，以获得最佳观察效果。

4.观察与记录：仔细观察样品细节，可通过移动载物台对样品不同区域进行观察。如需记录，可使用绘图、摄影装置或直接记录观察结果。

3.5油镜观察（如配备）

1.准备工作：油镜观察通常在高倍镜观察基础上进行。确保样品玻片干净，载物台清洁。

2.滴加镜油：在样品观察区域的盖玻片上（或无盖玻片时直接在样品上），滴加一小滴专用香柏油。

3.转换油镜：旋转物镜转换器，将油镜（通常为100×）对准通光孔，使油镜镜头浸入香柏油中，并与盖玻片（或样品）轻轻接触。

4.调焦与调节：

*从侧面注视，小心转动粗准焦螺旋（或通过载物台升降），使油镜