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2025年生命科学技术师职业资格考试《生命科学实验技术》备考题库及答案解析

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一、选择题

1.在进行PCR实验时，以下哪一项不是必需的（）

A.模板DNA

B.引物

C.DNA聚合酶

D.RNA聚合酶

答案：D

解析：PCR（聚合酶链式反应）是一种在体外扩增特定DNA片段的技术，其核心组件包括模板DNA、能够特异性结合目标序列的引物以及能够合成新DNA链的DNA聚合酶。RNA聚合酶主要用于转录过程，将DNA模板转录成RNA，与PCR反应无关。

2.电泳技术中，凝胶电泳的主要原理是什么（）

A.离子交换

B.沉淀反应

C.电场作用下的物质迁移

D.超滤作用

答案：C

解析：凝胶电泳是利用电场作用，使带电物质在凝胶基质中按其电荷、大小和形状进行分离的技术。带电物质在电场中会向阳极或阴极移动，移动速度受其电荷性质、分子大小和凝胶孔径的影响。

3.在细胞培养过程中，无菌操作的主要目的是什么（）

A.提高细胞生长速度

B.增加细胞数量

C.防止微生物污染

D.改善细胞形态

答案：C

解析：细胞培养要求在无菌环境中进行，以防止外源微生物的污染。微生物污染会导致实验结果不准确，甚至使细胞培养物完全失效。无菌操作包括使用无菌工具、在超净工作台中操作、定期灭菌培养皿和培养基等。

4.以下哪种方法常用于检测蛋白质的浓度（）

A.紫外分光光度法

B.薄层色谱法

C.气相色谱法

D.离子交换色谱法

答案：A

解析：紫外分光光度法是检测蛋白质浓度的常用方法，因为蛋白质分子中含有酪氨酸和色氨酸等氨基酸，这些氨基酸在280nm波长处有强烈的吸收峰。通过测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度，可以计算出蛋白质的浓度。

5.在酶联免疫吸附实验（ELISA）中，酶标板的作用是什么（）

A.固定抗体

B.结合抗原

C.显色反应

D.洗涤溶液

答案：A

解析：在ELISA实验中，酶标板用于固定抗体或抗原。通常，ELISA的第一步是将抗体包被在酶标板的孔中，然后加入待测样本，样本中的抗原与包被的抗体结合。之后，通过洗涤去除未结合的样本成分，最后加入酶标二抗进行显色反应。

6.基因测序技术中，Sanger测序法的基本原理是什么（）

A.电泳分离

B.化学降解

C.聚合酶链式反应

D.加法测序

答案：B

解析：Sanger测序法（链终止法）的基本原理是利用带有不同荧光标记的脱氧核苷酸（dNTPs）的延伸反应。在DNA合成过程中，当DNA聚合酶延伸到模板链的终止子（如NGS）时，延伸会停止。通过将带有不同荧光标记的终止子掺入到新合成的DNA链中，可以得到一系列不同长度的DNA片段。这些片段通过电泳分离，根据荧光信号可以确定每个片段的末端核苷酸，从而推知原始DNA序列。

7.在微生物培养过程中，培养皿的灭菌通常采用什么方法（）

A.干热灭菌

B.高压蒸汽灭菌

C.紫外线照射

D.乙醇消毒

答案：B

解析：培养皿的灭菌通常采用高压蒸汽灭菌法。高压蒸汽灭菌法能够有效杀灭细菌、真菌等微生物，确保培养皿在微生物培养过程中的无菌性。干热灭菌主要用于耐热物品的灭菌，紫外线照射主要用于表面消毒，乙醇消毒主要用于手部和工具的消毒，但效果不如高压蒸汽灭菌。

8.在蛋白质纯化过程中，离子交换色谱法的主要分离原理是什么（）

A.分子大小

B.溶解度

C.电荷性质

D.构象

答案：C

解析：离子交换色谱法的主要分离原理是利用蛋白质分子与离子交换树脂之间的电荷相互作用。离子交换树脂带有固定电荷，当蛋白质溶液通过树脂时，带有相反电荷的蛋白质会与树脂结合。通过改变缓冲液的pH值或离子强度，可以调节蛋白质与树脂之间的结合力，从而实现蛋白质的分离。

9.在细胞凋亡实验中，常用的染色方法是（）

A.苏木精染色

B.TUNEL染色

C.免疫荧光染色

D.Giemsa染色

答案：B

解析：TUNEL（末端脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口末端标记）染色是检测细胞凋亡常用的方法。细胞凋亡时，DNA会发生断裂，产生游离的3羟基末端。TUNEL技术利用末端脱氧核糖核酸转移酶在DNA断裂处添加荧光标记的脱氧核苷酸，从而检测到凋亡细胞。

10.在基因工程中，限制性内切酶的主要作用是什么（）

A.合成DNA

B.连接DNA片段

C.切割DNA分子

D.转录RNA

答案：C

解析：限制性内切酶是一类能够识别并切割DNA分子特定位点的酶。它们在基因工程中主要用于切割DNA分子，以便进行基因克隆、基因编辑等操作。DNA连接酶用于连接DNA片段，DNA聚合酶用于合成DNA，RNA聚合酶用于转录RNA。

11.在进行蛋白质印迹（WesternB