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动物实验样本保存要求

###一、动物实验样本保存概述

动物实验样本的保存是确保实验结果准确性和可靠性的关键环节。规范的样本保存能够有效防止样本污染、降解或变质，从而保证后续分析工作的顺利进行。本指南旨在提供一套系统化的样本保存要求，涵盖样本采集、运输、处理、储存及销毁等全流程，以确保样本质量。

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###二、样本采集要求

####（一）采集前的准备

1.**核对实验信息**：确认实验动物的编号、品系、性别、年龄、体重等基本信息，并记录实验环境条件（如温度、湿度）。

2.**准备采集工具**：确保所有采集工具（如注射器、采血管、手术器械）经过严格消毒，并配备必要的防护用品（如手套、口罩）。

3.**制定采集方案**：根据实验目的选择合适的采集方法（如血液、组织、尿液等），并提前规划采集顺序和频率。

####（二）采集过程中的注意事项

1.**减少应激反应**：尽量缩短麻醉或保定时间，避免动物过度紧张导致样本质量下降。

2.**规范操作流程**：严格按照标准操作程序（SOP）进行采集，避免人为污染。

3.**实时记录**：立即记录样本采集时间、动物状态、环境变化等关键信息。

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###三、样本运输要求

####（一）运输前的处理

1.**样本标识**：在采集后立即贴上包含实验编号、采集时间等信息的标签。

2.**初步处理**：根据样本类型进行初步处理（如血液分离、组织固定等）。

####（二）运输条件

1.**温度控制**：

-血液样本：室温运输（4-25℃），避免剧烈晃动。

-组织样本：立即浸泡于固定液（如4%多聚甲醛）中，并放置于4℃冰箱运输。

-尿液样本：冷藏（4℃）运输，若需长期保存可添加防腐剂。

2.**运输时间**：尽量缩短运输时间，一般不超过2小时。若距离较远，需采用冷藏车或冰袋辅助运输。

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###四、样本储存要求

####（一）短期储存（≤72小时）

1.**血液样本**：

-离心分离血浆或血清，置于-20℃或-80℃冰箱保存。

-未分离样本可冷藏（4℃）保存，但需每日轻摇混匀。

2.**组织样本**：

-立即固定于合适介质（如4%多聚甲醛或乙醇），置于4℃冰箱保存。

3.**尿液样本**：冷藏（4℃）保存，必要时加入防腐剂。

####（二）长期储存（72小时）

1.**冷冻储存**：

-血浆/血清：分装后置于-80℃冰箱，避免反复冻融。

-组织样本：梯度冷冻（-20℃→-80℃），并添加干冰辅助降温。

-细胞样本：添加冻存液（含DMSO等），分装后-80℃保存。

2.**液氮储存**：对高价值样本（如稀有细胞系）可采用液氮罐长期保存。

####（三）储存环境要求

1.**温度控制**：

-4℃冰箱：用于短期冷藏样本。

--20℃冰箱：用于常规冷冻样本。

--80℃冰箱：用于长期冷冻样本。

-液氮罐：温度控制在-196℃。

2.**湿度管理**：保持储存环境干燥，避免样本受潮。

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###五、样本处理与检测

####（一）处理流程

1.**解冻步骤**：

--80℃样本先移至4℃冰箱过夜，次日室温解冻。

-液氮样本快速浸入37℃水浴解冻。

-解冻后立即进行质量检查（如浑浊度、颜色异常等）。

2.**前处理方法**：

-血液样本：离心分离血浆/血清，去除细胞碎片。

-组织样本：脱水、包埋、切片（如需病理分析）。

-尿液样本：过滤除菌（如需微生物学检测）。

####（二）检测前的准备

1.**试剂校准**：确保所有检测试剂在有效期内，并按说明书校准。

2.**仪器验证**：定期对检测设备（如离心机、分光光度计）进行性能验证。

3.**质控样本**：每批实验加入质控样本，监控检测稳定性。

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###六、样本销毁要求

####（一）销毁条件

1.**实验结束**：所有实验样本在实验结束后需按规定销毁。

2.**异常样本**：检测不合格或无法分析的样本应立即销毁。

####（二）销毁方法

1.**生物安全柜处理**：液体样本可通过高压灭菌（121℃，15分钟）灭活后丢弃。

2.**组织样本**：干燥焚烧或深埋，确保无生物活性残留。

3.**记录存档**：销毁过程需记录时间、人员、样本编号等信息，并归档备查。

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###七、质量控制与记录

####（一）质量控制措施

1.**双人核对**：样本采集、储存、检测各环节需双人核对。

2.**定期抽检**：每月对储存样本进行抽样检测，评估保存效果。

3.**SOP培训**：所有操作人员需接受标准化操作培训并考核。

####（二）记录管理

1.**电子记录**：建立样本数据库，记录采集、运输、储存、检测等全流程信息。

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