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;课标要求1.阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织,分散成单个细胞后,在适宜的培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础。
2.阐明动物细胞核移植一般是将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中,并使重组细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的过程。;3.阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段,使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
4.概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。
5.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。;一、动物细胞培养
1.原理:________。
2.地位:动物细胞工程常用的技术包括动物细胞培养、____________和动物细胞核移植等,其中____________是动物细胞工程的基础。;3.培养条件
(1)
(2);(3)
(4);4.培养过程;1.(人教版选择性必修3P45图2-12)用胰蛋白酶处理动物组织,对细胞的消化有两种情况:
(1)短时间内细胞不会被消化,原因是细胞表面具有糖蛋白,对细胞具有一定的保护作用。
(2)长时间后细胞会被消化,原因是细胞表面糖蛋白的保护作用是有限的;细胞膜主要成分中的蛋白质可被胰蛋白酶水解。;二、干细胞培养及其应用;2.(人教版选择性必修3P46相关信息)科学家借助载体将特定基因导入细胞中,直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞。;1.在进行动物细胞培养时,通常采用培养皿或打开培养瓶盖的方式以获取细胞代谢所需的O2。 ();3.营养供应充足时,传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制。 ();科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导多能干细胞(iPS细胞),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠,流程如图:;(1)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称为________,培养的细胞在贴壁生长至充满培养皿底时停止分裂,这种现象称为________。经过多次传代后,供体细胞中________的稳定性会降低,因此,选材时必须关注传代次数。;(2)小鼠胚胎干细胞(ES细胞)可由囊胚的分离培养获得________________,iPS细胞与ES细胞同样具有发育的全能性,有望在对人类iPS细胞进行定向________后用于疾病的细???治疗。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。当重组胚胎培养到________期时,可从其内细胞团分离出ES细胞。;(3)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆,理论上可获得无限个转基因黑鼠,这是因为________________________________________________________________________________________________。
(4)细胞融合实验完成后,未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是___________________________________________。;考向动物细胞培养
1.(2024·淮安市模拟)下图为肾上皮细胞培养过程示意图。下列有关叙述错误的是()
A.甲→乙过程可用机械法或酶
解法处理获得单个细胞
B.丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中原代培养
C.丙过程会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象
D.丁过程为传代培养,细胞都能进行无限增殖;D[甲→乙过程可用机械法或酶解法处理获得单细胞悬液然后进行细胞培养,A正确;丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中原代培养的过程,属于获取单细胞悬液的初次培养,B正确;丙过程为原代培养,该过程中会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象,C正确;丁过程为传代培养,细胞传至10~50代会逐渐缓慢,直到完全停止,当继续传代培养时少部分细胞会获得不死性,这些细胞已经发生了突变,D错误。];2.科学家将Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞,经培养后这些细胞显示出ES细胞的形态,具有活跃的分裂能力,称为iPS细胞。若将病人的皮肤成纤维细胞诱导成iPS细胞,可用于疾病治疗。下列叙述错误的是()
A.在该实验过程中逆转录病毒作为目的基因的载体
B.借助动物细胞培养技术,iPS细胞能进行多次传代培养
C.iPS细胞用于疾病治疗时一般不会引起免疫排斥反应
D.iPS细胞用于疾病治疗时不存在分化为肿瘤细胞的风险;D[逆转录病毒可以通过逆转录合成DNA,并且将合成的DNA整合到宿主细胞的DNA上,通过题干信息可知,逆转录病毒的作用是作为载体,将外源基因Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4送入小鼠成纤维细胞中,A正确;iPS细胞具有活跃的分裂能力,能借助动物细胞培养技术进行多次传代培养,B正确;因为在诱导分化的过程中细胞的遗传物质没有发生
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