β-烟酰胺单核苷酸（NMN）含量的测定 核磁共振波谱法.docxVIP

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中国营养保健食品协会团体标准

T/CNHFA439—2025

β一烟酰胺单核苷酸(NMN)含量的测定核磁共振波谱法

Determinationofβ-nicotinamidemononucleotide(NMN)content—nuclearmagneticresonancespectrometry

2025-10-29发布

2025-11-29实施

中国营养保健食品协会发布

T/CNHFA439—2025

I

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本文件由中国质量检验检测科学研究院提出。

本文件由中国营养保健食品协会归口。

本文件起草单位：中国质量检验检测科学研究院、检科院商务服务（北京）有限公司、北京体育大学、南京诺云生物科技有限公司。

本文件主要起草人：张紫娟、吴博隆、张佳琳、范春林、于梅、于水生、严翊、马百超、许磊。

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β-烟酰胺单核苷酸（NMN）含量的测定核磁共振波谱法

1范围

本文件规定了β-烟酰胺单核苷酸（NMN）含量的测定方法——核磁共振波谱法。

本文件适用于NMN原料，及以NMN为标志性成分生产的片剂、粉剂、颗粒剂、硬胶囊剂中NMN含量的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

JY/T0578-2020超导脉冲傅里叶变换核磁共振波谱测试方法通则

JJF1448-2014超导脉冲傅里叶变换核磁共振波谱仪校准规范

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

NMN：nicotinamidemononucleotide，β-烟酰胺单核苷酸。

5方法原理

化合物氢原子所处化学环境不同，其信号峰出峰位置和裂分情况会有所不同，在充分弛豫条件下，信号峰的峰面积与氢原子数量成正比。选择合适的特征信号峰和内标物，使用核磁共振波谱仪采集核磁共振氢谱，采用外标法定量测定样品中NMN的含量。

6仪器设备

核磁共振波谱仪：氢（1H）共振频率不低于400MHz；可控温，温度精度不低于±0.1℃。

核磁共振样品管：外径5mm，同心且均匀。

分析天平：感量为0.01mg。

涡旋振荡器。

低速离心机。

移液器：10μL～100μL，20μL～200μL，100μL～1000μL。

7试剂和材料

除另有规定外，所有试剂均为分析纯。

重水（D2O）：氘代率不小于99.8%。

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7.23-三甲基硅烷基-2,2,3,3-氘代丙酸钠(TSP-d4,CAS号：24493-21-8)。

7.3NMN(CnH?5N?O?P,CAS号：1094-61-7)标准品：纯度不小于98%,或国家有证标准物质。

7.4TSP-d4溶液(1mg/mL):称取10mgTSP-d4(7.2)至10mL容量瓶，用重水(7.1)定容，混匀。

7.5NMN标准储备液(33.42mg/mL):称取334.2mgNMN标准品(7.3)至10mL容量瓶，用TSP-d4溶液(7.4)定容，混匀，有效期7天。

7.6NMN系列标准工作液：准确吸取适量NMN标准储备液(7.5),用TSP-d4溶液(7.4)逐级稀释，配制成0.0668mg/mL、0.167mg/mL、0.334mg/mL、0.668mg/mL、1.671mg/mL、3.342mg/mL、6.684mg/mL、16.71mg/mL、33.42mg/mLNMN系列标准工作液，临用现配。

7.7水相滤膜：孔径0.22μm。

8检测步骤

8.1样品前处理

产品样品：取5~10g产品样品(胶囊类样品需去掉胶囊壳),充分研磨成粉末状，混匀，均分成三份，分别为测试样品、复检样品和保存样品，装入样品瓶，密封并标记，室温储存。

原料样品：无需特殊处理，可直接称取，装入样品瓶，密封并标记，室温储存。

8.2样品制备

准确称取处理好的样品10.00mg于2mL离