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BoNAC02基因与植物应激响应关系

目录

内容概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.1.1植物非生物胁迫环境概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

1.1.2BoNAC02基因发掘的背景信息．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

1.2国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

1.2.1NAC转录因子家族研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

1.2.2植物抗逆相关基因研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

1.2.3BoNAC02基因初步研究信息．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

1.3研究目标与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

1.3.1主要研究目的设定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

1.3.2具体研究内容概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

2.1研究材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

2.1.1实验材料来源与特性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

2.1.2植物品系及生长条件．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

2.2技术路线．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

2.2.1基因克隆与表达载构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

2.2.2基因功能验证基本流程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

2.3实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

2.3.1引物设计与合成．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45

2.3.2基因表达谱分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

2.3.3显著性鉴定与统计分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48

2.3.4转基因技术利用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50

2.3.5分子标记检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51

2.3.6表型观察与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52

2.3.7组织学结构观察．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54

BoNAC02基因结构及表达模式分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．58

3.1BoNAC02基因序列特征．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．59

3.1.1开放阅读框鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．60

3.1.2蛋白结构预测与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．62

3.1.3同源序列比对．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．63

3.2BoNAC02基因的表达模式分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．64

3.2.1正常生长条件下的表达谱．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．68

3.2.2非生物胁迫下的诱导表达模式．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．70

3.2.3不同胁迫组合下的表达变化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．75

BoNAC02基因功能验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．78

4.1BoNAC02基因的亚细胞定位．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．82

4.2BoNAC02基因功能互补实验．．．．．．．．．