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再生医学细胞增殖检测员岗位考试试卷及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.细胞增殖检测中最常用的方法是（）

A.台盼蓝染色B.MTT法C.流式细胞术D.免疫荧光法

2.细胞培养时，常用的血清是（）

A.马血清B.羊血清C.胎牛血清D.人血清

3.以下哪种显微镜适合观察活细胞（）

A.光学显微镜B.电子显微镜C.相差显微镜D.荧光显微镜

4.MTT法检测细胞增殖时，MTT溶液的作用是（）

A.杀死细胞B.与活细胞内线粒体脱氢酶反应C.使细胞染色D.促进细胞增殖

5.细胞传代时，常用的消化液是（）

A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.木瓜蛋白酶D.纤维素酶

6.细胞增殖的主要方式是（）

A.无丝分裂B.有丝分裂C.减数分裂D.二分裂

7.检测细胞周期常用的方法是（）

A.MTT法B.流式细胞术C.免疫印迹法D.酶联免疫吸附测定

8.细胞培养箱中气体成分主要是（）

A.O?和CO?B.N?和CO?C.O?和N?D.CO和CO?

9.细胞冻存时，常用的保护剂是（）

A.甘油B.乙醇C.DMSOD.丙酮

10.细胞增殖检测的样本一般要求（）

A.死细胞B.活细胞C.固定细胞D.破碎细胞

二、多项选择题（每题2分，共20分）

1.细胞增殖检测方法包括（）

A.直接计数法B.比色法C.放射性核素掺入法D.荧光定量法

2.细胞培养所需的基本条件有（）

A.合适的培养基B.适宜的温度C.气体环境D.无菌条件

3.影响细胞增殖的因素有（）

A.营养物质B.生长因子C.激素D.细胞密度

4.流式细胞术可以检测细胞的（）

A.细胞周期B.细胞凋亡C.细胞表面标志物D.细胞内蛋白表达

5.细胞传代的步骤包括（）

A.弃去旧培养基B.用PBS洗涤细胞C.加入消化液D.离心收集细胞

6.细胞冻存的注意事项有（）

A.缓慢降温B.选择合适的冻存液C.标记清楚D.尽快复苏

7.常用的细胞培养器皿有（）

A.培养瓶B.培养皿C.多孔板D.离心管

8.以下属于细胞增殖相关蛋白的有（）

A.CDKB.CyclinC.p53D.Rb

9.细胞增殖检测在再生医学中的应用有（）

A.评估干细胞增殖能力B.监测组织修复进程C.筛选药物D.研究疾病发病机制

10.细胞培养过程中可能出现的污染有（）

A.细菌污染B.真菌污染C.支原体污染D.病毒污染

三、判断题（每题2分，共20分）

1.MTT法检测的是细胞的代谢活性，可间接反映细胞增殖情况。（）

2.细胞培养时，培养基中血清浓度越高越好。（）

3.光学显微镜可以观察到细胞内的细胞器结构。（）

4.细胞传代次数越多，细胞增殖能力越强。（）

5.流式细胞术检测细胞周期时，不需要对细胞进行固定。（）

6.细胞冻存液中DMSO的作用是防止细胞内冰晶形成。（）

7.细胞增殖过程中，DNA含量会发生变化。（）

8.培养细胞时，CO?的作用是维持培养基的pH。（）

9.细胞增殖检测只能用于动物细胞，不能用于植物细胞。（）

10.无菌操作是细胞培养成功的关键因素之一。（）

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述MTT法检测细胞增殖的原理。

MTT是一种黄色染料，活细胞内线粒体中的脱氢酶可将MTT还原为不溶性的蓝紫色结晶物（Formazan），其生成量与活细胞数量和活性呈正相关。通过酶标仪测定OD值，可间接反映细胞增殖情况。

2.细胞培养过程中如何防止污染？

保持操作环境无菌，如超净台定期消毒；使用无菌的培养基、试剂和器皿；操作人员严格遵守无菌操作规程，如戴口罩、手套，操作前用酒精消毒；定期观察细胞状态，发现污染及时处理。

3.简述流式细胞术检测细胞周期的基本步骤。

首先收集细胞，然后用固定液固定细胞，使细胞通透；接着用核酸染料（如PI）对细胞DNA进行染色；最后通过流式细胞仪检测，根据不同时期细胞DNA含量不同，在直方图上呈现不同峰，从而分析细胞周期分布。

4.细胞冻存和复苏的要点有哪些？

冻存要点：缓慢降温，一般用程序降温盒；选择合适冻存液，含保护剂；标记好细胞信息。复苏要点：快速解冻，将冻存管迅速放入37℃水浴中，待融化后尽快转移至培养基中培养。

五、讨论题（每题5分，共20分）

1.请讨论在再生医学研究中，细胞增殖检测的重要性及面临的挑战。

重要性：可评估干细胞活性与增殖能力，为组织修复和再生提供依据；监测治疗效果，筛选有效治疗方案；研究疾病发生发展机制。挑战：检测方法的准确性和可靠性，不同方法结果可能有差异；细胞异质性影响检测结果；检测过程中样本处理和实验条件的标准化较难控制。

2.当细胞增殖检测结果出现异常时，可能有哪些原因？

可能原因包括：细胞自身因素，如细胞老化、发生变异；培养条件问题，如培养基成分不合适、血清质量差、温度或pH不适宜；检测方法问题，如操作不规范、试剂过期、仪器故障；存在污染，细菌、真菌或支原体污染影响细