微生物多糖提取与纯化.pptVIP

微生物多糖的提取与纯化;微生物多糖的提取与纯化

一、微生物多糖简介

二、微生物多糖功能简介

三、微生物多糖的提取与纯化工艺简介

（一）真菌多糖的提纯

（1）、灵芝多糖的提取与纯化

（2）、香菇多糖的提取与纯化

（二）细菌性脂多糖的提取

（1）、大肠杆菌O157：H7脂多糖提取（2）、肠炎沙门氏菌脂多糖提取

四、参照文献;微生物多糖于20世纪50年代起备受人们的关注，人们对其进行了大量科学研究。微生物多糖重要由真菌多糖和细菌脂多糖两大类构成。20世纪50年代，Jeanes等人筛选、获得了许多黄原胶(Xanthangum)的产生菌。1964年，原田等人从土壤中分离到产凝结多糖(Curdlan，又称热凝多糖)的细菌，后发现农杆菌(Agrobacteriumsp.)也可以产生该多糖.1975年，美国人生产制造了产生于少动鞘脂类单胞菌(Sphingomonaspaucimobilis，旧称伊乐藻假单胞菌)的结冷胶(Gellangum，又称胶联多糖)。随即，小核菌葡聚糖(Scleeroglucan)、短梗霉多糖(Pullulan，又称普鲁蓝)、透明质酸(Hyaluronicacid)、壳聚糖(Chitasan)等微生物多糖又相继被人们发现;黄原胶是新型多糖类发酵产品，1961年首先由美国Kelco企业投入工业化生产，目前被广泛应用于食品、石油、地矿、陶瓷、纺织、印染、医药、造纸、灭火、涂料、化妆品等20多种行业，用作30--40多种品种。

黄原胶被誉为“工业味精”，是目前世界上生产规模最大且用途极为广泛的微生物多糖。;微生物多糖具有广泛的应用价值，已作为乳化剂、增稠剂、稳定剂、胶凝剂、悬浮剂、润滑剂、食品添加剂、抗癌医药物等应用于石油、化工、食品、医疗、制药保健等多种领域。因此研究其提取与纯化措施有着重要意义。;微生物多糖广泛的应用价值

1、食品工业黄原胶、结冷胶、小核菌葡聚糖、短梗霉多糖、热凝多糖等，可以作为食品添加剂、凝结剂、保鲜剂等

2、医药领域大多数真菌多糖具有抗肿瘤、免疫调整、抗衰老、抗感染等生物学功能

3、环境保护(污水处理)微生物代谢产物处理废水是一种极具应用前景的废水处理方式，多糖是该代谢???物的重要成分，因它所带的负电荷基团可以和二价阳离子结合而在生物絮凝和重金属处理中起着非常重要的作用

;微生物多糖的提纯措施

微生物多糖的种类多样，性质各异。根据多糖种类、性质的不一样，可以采用不一样的提取纯化措施。

A、胞内和胞壁多糖的提取先破碎细胞，然后在80一100℃下以水(或氢氧化钠、氢氧化钾水溶液)为溶剂反复提取2一3次。将得到的多糖溶液进行离心除去不溶物质，减压浓缩后合并上清溶液，然后用乙醇或异丙醇沉淀多糖；再次离心后用丙酮、乙醇等有机溶剂洗涤，再冷冻干燥得到多糖粗制品。

;B、胞外多糖的提取

离心发酵液除去菌体得到上清，然后用有机溶剂沉淀多糖，静置、离心、干燥就可以得到多糖粗制品了.粗多糖中常具有蛋白质等杂质，常用Sevage法、三氟三氯乙烷法和三氯乙酸法、酶法清除，这四种措施各有优缺陷。;Sevage法是根据蛋白质在氯仿等有机溶剂中变性的特点，将糖溶液和Sevage液(V氯仿:V正丁醇=3:1一5:1)混合后剧烈震荡10min～3omin，静止或离心后除去水层和溶剂交界处的变性蛋白。此法除蛋白效率不高，但多糖不易降解。

三氟三氯乙烷法是将多糖溶液与三氟三氯乙烷等比混合后搅拌、离心，如此反复几次即得到无蛋白糖溶液，但三氟三氯乙烷易挥发不适宜大量使用。;三氯乙酸法是向多糖溶液中滴加三氯乙酸至不再继续出现混浊为止，离心除去沉淀即得到无蛋白的多糖溶液，但此法会引起多糖的降解。

酶法清除蛋白条件最温和，不易引起多糖的降解，但不一样的酶作用于不一样的蛋白，因此要先进行不一样酶除蛋白能力的探索，最终才能确定最佳的除蛋白酶法。;得到的多糖也许是多种多糖的混合样品，还要采用分部沉淀法、季胺盐沉淀法、柱层析法、超滤法、制备性区域电泳等措施深入分离纯化。;灵芝多糖的提取与纯化工艺

灵芝为多孔菌科真菌灵芝的子实体。在我国作为药物已经有数年的历史。灵芝多糖是灵芝最重要的生理活性成分。目前分离到的灵芝多糖达200种之多，大部分为β型葡聚糖，分子量从数千到数万不等，不溶于高浓度乙醇，可在热水中溶解。现代研究表明，灵芝多糖具有抗血栓、抗肿瘤、抗辐射、抗氧化、免疫调整、保肝、降压作用。

;灵芝多糖的分离：;灵芝菌