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2025病原生物学微生物鉴定试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.关于革兰染色法的关键步骤，正确的是（）

A.结晶紫初染时间需30秒

B.95%乙醇脱色时间越长越彻底

C.卢戈碘液媒染可增强染料与细菌结合

D.沙黄复染后革兰阳性菌呈红色

答案：C

解析：卢戈碘液作为媒染剂，可与结晶紫结合形成复合物，增强染料与细菌细胞壁的结合力；革兰阳性菌因细胞壁肽聚糖层厚，脱色后保留结晶紫-碘复合物，复染后仍呈紫色（沙黄复染仅使革兰阴性菌呈红色）；乙醇脱色时间过长会导致革兰阳性菌被误染为阴性，通常控制在10-30秒。

2.鉴定肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌的关键试验是（）

A.触酶试验

B.Optochin敏感试验

C.胆汁溶菌试验

D.菊糖发酵试验

答案：B

解析：肺炎链球菌对Optochin（乙基氢化叩卜林）敏感，在含5μgOptochin纸片周围会出现直径≥14mm的抑菌圈；甲型溶血性链球菌则无此现象。胆汁溶菌试验（阳性）和菊糖发酵试验（阳性）虽可辅助鉴别，但Optochin试验特异性更高。

3.以下哪种微生物需用巧克力培养基分离培养？（）

A.伤寒沙门菌

B.淋病奈瑟菌

C.产气荚膜梭菌

D.铜绿假单胞菌

答案：B

解析：淋病奈瑟菌为苛养菌，需在含V因子（NAD）和X因子（血红素）的巧克力培养基中生长（加热血液使V、X因子释放）；伤寒沙门菌用SS琼脂，产气荚膜梭菌用庖肉培养基或血平板厌氧培养，铜绿假单胞菌在普通血平板即可生长。

4.检测结核分枝杆菌最常用的分子生物学方法是（）

A.16SrRNA基因测序

B.IS6110插入序列PCR

C.多位点序列分型（MLST）

D.脉冲场凝胶电泳（PFGE）

答案：B

解析：结核分枝杆菌基因组中存在多个拷贝的IS6110插入序列（部分菌株含1-25个），以其为靶标的PCR检测灵敏度高，是临床常用方法；16SrRNA基因测序主要用于细菌种属鉴定，但结核分枝杆菌属内16SrRNA同源性高，鉴别能力有限。

5.关于霍乱弧菌的鉴定特征，错误的是（）

A.革兰阴性弧菌，单鞭毛

B.氧化酶试验阳性

C.能分解蔗糖产酸

D.神奈川试验阳性

答案：D

解析：神奈川试验（KP试验）是副溶血性弧菌的鉴定指标（在含高盐甘露醇血平板上产生β溶血）；霍乱弧菌分解蔗糖产酸（TCBS培养基上呈黄色菌落），氧化酶阳性，单鞭毛运动活泼。

6.用于区分金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌的关键试验是（）

A.凝固酶试验

B.触酶试验

C.耐热核酸酶试验

D.甘露醇发酵试验

答案：A

解析：金黄色葡萄球菌可产生游离凝固酶（试管法）和结合凝固酶（玻片法），使血浆凝固；表皮葡萄球菌凝固酶试验阴性（极少数菌株可能弱阳性）。触酶试验两者均阳性（排除链球菌属），甘露醇发酵试验部分表皮葡萄球菌也可阳性，故非关键。

7.新生隐球菌的典型鉴定特征是（）

A.芽管试验阳性

B.墨汁负染可见宽厚荚膜

C.沙保弱培养基上产生菌丝

D.尿素酶试验阴性

答案：B

解析：新生隐球菌为酵母型真菌，墨汁负染时，背景黑色，菌体周围可见透明宽厚荚膜（其他酵母如白假丝酵母菌无此特征）；芽管试验阳性是白假丝酵母菌的特征，沙保弱培养基上新生隐球菌形成酵母样菌落（无菌丝），尿素酶试验阳性（分解尿素产氨）。

8.检测艰难梭菌毒素最常用的方法是（）

A.细胞毒性试验

B.乳胶凝集试验

C.酶联免疫吸附试验（ELISA）

D.荧光定量PCR

答案：C

解析：ELISA可快速检测艰难梭菌A毒素（肠毒素）和B毒素（细胞毒素），敏感性和特异性均较高（约85%-95%）；细胞毒性试验虽为金标准（将粪便滤液加入细胞培养，观察细胞病变），但操作复杂、耗时；PCR主要检测毒素基因（tcdA/tcdB），但无法区分产毒与非产毒菌株。

9.以下哪种细菌在血平板上可形成“β溶血环+透明溶血环”的双溶血现象？（）

A.产气荚膜梭菌

B.无乳链球菌

C.肺炎克雷伯菌

D.粪肠球菌

答案：A

解析：产气荚膜梭菌产生α毒素（卵磷脂酶）和θ毒素（溶血素），在血平板厌氧培养时，α毒素破坏细胞膜形成较大的透明溶血环（完全溶血），θ毒素在其周围形成不完全溶血的模糊环，呈现双溶血现象；无乳链球菌为β溶血（单一透明环），其他选项无典型溶血特征。

10.鉴定肠出血性大肠杆菌（EHEC）的关键指标是（）

A.乳糖发酵试验阳性

B.血清型