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2025年病原微生物实验室生物安全技能提升培训题库及答案

1.依据《病原微生物实验室生物安全管理条例》，高致病性病原微生物的分类标准是什么？

答：高致病性病原微生物指第一类、第二类病原微生物。其中，第一类病原微生物是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物；第二类病原微生物是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。具体名录由国务院卫生主管部门会同兽医主管部门制定、调整并公布。

2.BSL-3实验室核心工作间的气压要求是什么？其与相邻区域的压差应达到多少？

答：BSL-3实验室核心工作间应保持负压，气压低于相邻区域。与相邻缓冲间、走廊的压差应不小于-10Pa（以缓冲间为参考），与室外大气压的压差通常维持在-30Pa至-50Pa之间，具体需符合《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2022）中对三级生物安全实验室的压力梯度规定，确保气流由低风险区域向高风险区域单向流动。

3.实验室人员在处理含有结核分枝杆菌的样本时，应选择何种等级的生物安全柜？操作过程中需注意哪些关键事项？

答：应选择Ⅱ级B2型生物安全柜（全排型）或Ⅱ级A2型生物安全柜（部分循环，需确认排风符合排放标准）。操作时需注意：①提前30分钟启动生物安全柜，确保气流稳定；②操作区域内仅放置必要物品，避免遮挡回风格栅；③样本管应放置于防漏托盘内，移液时避免液体飞溅；④操作结束后，用75%乙醇或0.5%次氯酸钠溶液擦拭台面，关闭前运行10分钟以清除残留气溶胶；⑤禁止在生物安全柜内使用明火，防止破坏气流平衡。

4.实验室发生1ml含有HIV病毒的样本管破裂，液体泼洒在生物安全柜台面时，应采取哪些应急处置步骤？

答：①立即停止操作，保持生物安全柜运行，避免人员快速移动扰动气流；②穿戴好额外防护装备（如双层手套、护目镜）后，用吸水纸覆盖泼洒区域，从外围向中心缓慢倾倒0.5%次氯酸钠溶液（作用30分钟）；③用镊子夹取污染的吸水纸放入防漏医疗废物袋，标记“感染性废物”；④用干净纱布蘸取0.5%次氯酸钠溶液再次擦拭台面，最后用75%乙醇擦拭去除残留次氯酸钠；⑤记录事件经过、处理措施及参与人员，报告实验室负责人；⑥对涉事人员进行暴露风险评估，必要时启动暴露后预防（PEP）程序。

5.高压蒸汽灭菌器的生物监测应如何实施？标准合格的判断依据是什么？

答：生物监测应使用嗜热脂肪芽孢杆菌（ATCC7953或SSI3524）芽孢菌片，每批次灭菌时放置于最难灭菌的位置（如物品中心、灭菌器底层）。灭菌完成后，将菌片接种于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培养基，56℃培养48小时（或按说明书要求）。若培养基保持紫色（无细菌生长），判定为灭菌合格；若变黄（细菌生长），则灭菌失败，需追溯该批次物品并重新灭菌。每月应至少进行1次生物监测，记录结果并保存。

6.实验室人员进入BSL-3实验室的个人防护装备（PPE）穿戴顺序是什么？脱卸时需遵循哪些原则？

答：穿戴顺序：①换实验室专用鞋；②戴一次性工作帽（覆盖所有头发）；③穿内层防护服（连体或分体，确保袖口、脚踝收紧）；④戴医用防护口罩（N95及以上，进行密合性测试）；⑤戴护目镜或面罩（确保无漏光）；⑥穿外层防护服（符合GB19082-2009的医用一次性防护服）；⑦戴双层手套（内层为丁腈手套，外层为厚乳胶手套，确保覆盖防护服袖口）；⑧必要时穿戴鞋套（覆盖至小腿）。

脱卸原则：①在缓冲间分区域脱卸（污染区→半污染区→清洁区）；②脱卸时避免接触污染面，动作轻柔防止气溶胶扩散；③外层手套、防护服、护目镜先脱，脱卸后立即放入感染性废物袋；④摘口罩时仅接触耳带，避免触碰面部；⑤脱卸完成后立即进行手消毒（含醇类速干手消毒剂作用1分钟），必要时淋浴；⑥记录PPE使用情况，异常破损需及时报告。

7.运输高致病性病原微生物样本时，需满足“三重包装系统”的具体要求是什么？

答：三重包装系统包括：①主容器：防漏、耐冲击的样本管或安瓿瓶，需标注样本信息、生物危害标识，内填充吸水材料（如纱布）吸收泄漏液体；②辅助包装：防水、抗压的次级容器（如塑料罐或金属盒），与主容器之间填充缓冲材料（如泡沫），确保主容器固定不移动；③外容器：符合国际航空运输协会（IATA）PI650标准的硬质运输箱（如瓦楞纸箱或金属箱），需标注“感染性物质”“UN2814”（人类源）或“UN2900”（动物源）标识，附带运输文件（包括样本名称、数量、收发货人信息、应急联系电话）。运输前需通过压力测试（95kPa）验证包装密封性。

8.实验室废弃的一次性移液器吸头（已接触HBV阳性样本）应如何处理？

答：①吸头