DB35T 916-2009 猪瘟抗体金标试纸检测方法.docxVIP

DB35T9162009猪瘟抗体金标试纸检测方法

本标准规定了猪瘟抗体金标试纸检测方法的原理、试剂与材料、仪器设备、样品采集与处理、操作步骤、结果判定、质量控制及注意事项等内容。本标准适用于猪血清中猪瘟抗体的快速检测，为猪瘟疫情的监测、免疫效果评估及流行病学调查提供技术支持。

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性传染病，被世界动物卫生组织列为必须报告的动物疫病，也是我国一类动物疫病。该病具有传染性强、致死率高的特点，给养猪业造成巨大的经济损失。准确、快速地检测猪瘟抗体水平对于猪瘟的防控具有重要意义。金标试纸检测方法作为一种新型免疫学检测技术，具有操作简便、检测快速、结果直观、无需特殊设备等优势，特别适合基层实验室和现场检测使用。

本标准采用胶体金免疫层析技术原理，以猪瘟病毒重组抗原作为检测线包被抗原，以胶体金标记的猪瘟病毒特异性抗体作为示踪物。当待检血清中含有猪瘟抗体时，抗体与胶体金标记的猪瘟病毒特异性抗体结合，形成免疫复合物，该复合物在层析作用下向前移动，与检测线上的猪瘟病毒重组抗原结合，形成肉眼可见的红色条带。质控线包被有抗鼠IgG抗体，用于判断试纸条是否有效。

试剂与材料主要包括：猪瘟抗体金标试纸条（由检测板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸收纸组成）、样品稀释液（pH7.4的磷酸盐缓冲液，含0.5%牛血清白蛋白和0.1%Tween20）、阳性对照血清（猪瘟抗体效价≥1:32的猪血清）、阴性对照血清（无猪瘟抗体的猪血清）以及一次性吸头和离心管等。所有试剂应在28℃条件下保存，有效期12个月，使用前应恢复至室温。

仪器设备包括：微量移液器（量程10100μL，精度±5%）、台式离心机（转速≥3000r/min）、恒温水浴箱（温度控制精度±1℃）、计时器以及生物安全柜等。所有仪器设备应定期校准和维护，确保其性能符合检测要求。移液器应每6个月进行一次校准，离心机应每季度检查一次转速准确性。

质量控制要求每批检测必须同时设置阳性对照和阴性对照，阳性对照应出现明显的检测线和质控线，阴性对照应仅出现质控线。当对照结果不符合预期时，整批检测结果无效，需查明原因后重新检测。实验室应建立完善的室内质量控制体系，定期参加外部质量评价，确保检测结果的准确性和可靠性。

本标准自发布之日起实施，由福建省质量技术监督局负责解释。在标准实施过程中，如有修改建议或技术问题，应及时向标准起草单位反馈，以便不断完善和更新检测方法，为猪瘟防控工作提供更加科学、准确的技术支持。