维生素A测定方法详解.pptxVIP

2022维生素A的测定主讲人：赵燕强三氯化锑比色法

维生素A的测定维生素是维持人体正常生理功能必需的一类天然有机化合物，他们的种类很多，目前已经确认的有30多种，其中被认为对维持人体健康和促进发育至关重要的维生素有20余种。

维生素A的测定维生素对人体的主要功用是通过作为辅酶的成分调节代谢，需要量极少，但绝对不可缺少，维生素一般在体内不能合成或合成数量较少，不能充分满足机体需要必须经常由食物来供给。

维生素A的测定维生素可分为脂溶性维生素和水溶性维生素，脂溶性维生素有维生素?A?、维生素?D?、维生素?E?、维生素?K?等，水溶性维生素有维生素?C?和维生素?B?。

维生素A的测定在这些维生素中，人体比较容易缺乏而在营养上又较重要的维生素有：维生素?A?、维生素?D?、维生素?E?、维生素?B1、维生素?B2、烟酸、维生素?B6维生素?C?。

维生素A的测定维生素检验的方法主要有化学分析法及仪器分析法。仪器分析法中紫外、荧光法是多种维生素的标准分析方法，它们灵敏、快速有较好的选择性。仪器分析法灵敏/快速

维生素A的测定另外，各种色谱法以其独特的高分离效能，在维生素分析方面占有越来越重要的地位。化学分析法中的比色法、滴定法，具有简便、快速不需特殊仪器等优点，正为广大基层实验室所普遍采用。化学分析法简便/快速

维生素A是由β-紫罗酮环与不饱和一元醇所组成的一类化合物及其衍生物的总称，包括维生素?A1和维生素?A2。维生素A的测定维生素A维生素A1维生素A2

维生素A1就是视黄醇，它有多种异构体维生素A2就是3-脱氢视黄醇，是视黄醇（维生素?A1）的衍生物之一。维生素A的测定维生素A1视黄醇维生素A23-脱氢视黄醇衍生物

维生素?A2也有多种异构体，大家看图，图上就是这两个维生素的化学结构式，其中左边这个是维生素?A1右边这个是维生素?A2。维生素A的测定

维生素A1还有许多种衍生物，包括视黄醛（这是维生素A1末端的-CH2OH被氧化成了-CHO所形成的另外一个化合物)视黄酸（这是刚才的化合物视黄醛中的-?CHO?进一步被氧化成-COOH?，然后又生成了另一个新化合物)。维生素A的测定维生素A1视黄醇衍生物视黄酸

3-脱氢视黄醛、3-脱氢视黄酸及它们的各类异构体，它们也都具有维生素?A?的作用，总称为类视黄素。所以大家现在了解了，维生素A及其衍生物其实包含了很多种化合物。维生素A的测定类视黄素

维生素A的测定维生素A的测定方法有三氯化锑比色法、紫外分光光度法、荧光法气相色谱法和高效液相色谱法等，其中比色法应用最为广泛。三氯化锑比色法紫外分光光度法荧光法气相色谱法高效液相色谱法应用最为广泛

维生素A的测定1．三氯化锑比色法原理维生素A在三氯甲烷中与三氯化涕相互作用，产生蓝色物质，其深浅与溶液中所含维生素A的含量成正比。该蓝色物质虽不稳定，但在一定时间内可用分光光度计于620nm波长处测定其吸光度。

维生素A的测定2．试剂①无水硫酸钠（不吸附维生素?A?)。②乙酸酐。③无水乙醚（不含有过氧化物）。

维生素A的测定检查方法；取5mL乙醚加1mL10％碘化钾溶液，振摇1min，如果含过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色；或加入4滴0.5％淀粉溶液，水层呈蓝色；去除过氧化物的方法：重蒸乙醚时，弃去10％初馏液和最后剩下的10％残留液。

维生素A的测定④无水乙醇（不得含有醛类物质）。检查方法：在盛有2mL银氨溶液的小试管中，加入3~5滴无水乙醇，摇匀，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中含有醛。

维生素A的测定脱醛方法：取2g硝酸银，溶于少量水中。取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。将两者倾人盛有1L乙醇的试剂瓶内，振摇后，暗处放置2天（在这个期间需要时不时地摇动，以促进反应），经过滤，置蒸溜瓶中蒸馏，弃去初馏液50mL。若乙醇中含醛较多时，可适当增加硝酸银的用量。

维生素A的测定⑤三氯甲烷。应不含分解物，否则会破坏维生素?A?。⑥250g/?L?三氯化涕-三氯甲烷溶液。用三氯甲烷配制250g/?L?三氯化锑溶液，储于棕色瓶中（注意不要使溶液吸收水分）。⑦50％氢氧化钾溶液。取50g氢氧化钾，溶于50g水中，混匀。

维生素A的测定⑧维生素?A?或视黄醇乙酸酯标准液。视黄醇（纯度85%）或者视黄醇乙酸酯（纯度90%）经皂化处理后使用，用脱醛乙醇溶解维生素?A?标准品，使其浓度大约为1mL相当于1mg视黄醇，临用前用紫外分光光度法标定其准确浓度。⑨酚酞指示剂。用95％乙醇配制10g/?L?溶液。

维生素A的测定3．仪器和设备分光光度计、回流冷凝装置。

维生素A的测定4.操作步骤(1）样品处理根据样品性质，可采用皂化法或研磨法。①皂化法。适用于维生素?A?含量不高的样品，可减少脂溶性物质的干扰，但全部试验过程比较费时，并且易导致维生素?A?的损失