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植物生物技术;Science，2000，287：303-305;绪 论;植物组织细胞培养

植物基因工程

分子标记及辅助育种;外植体(explant):;Plants;第一章 植物组织离体培养的关键因素;Plantcellandtissuecultures:Landmark;物质;最早的植物组织培养基

1934年，White利用培养基成功离体培养番茄根(WhitePR.Potentiallyunlimitedgrowthofexcisedtomatoroottipsinaliquidmedium.PlantPhysiol,1934,9:585-600)(提出有效根培养基);;类型;元素是否必须，依据的4条原则(Epstein,1971,MineralNutritionofPlants.PrinciplesandPerspectives.JohnWileyandSonsInc.,NewYork,London,Sydney,Toronto)

aplantfailstocompleteitslifecyclewithoutit;

itsactionisspecificandcannotbereplacedcompletelybyanyotherelement;

itseffectontheorganismisdirect,notindirectontheenvironment;

itisaconstituentofamoleculethatisknowntobeessential.

植物生长必须元素：

大量：C、H、O、N、P、S、Ca、K、Mg

微量：Fe、Mn、Mo、Cu、Zn、B、Al(多数研究认为离体培养条件下不是必须的);Elements;Macroelements;分类;分类;;;植物凝胶(gellingagents,凝固剂)：是组织培养过程中用来凝固培养基的物质，其自身一般不具备营养，仅作为固体支持物。

选用原则

使用方便

对培养植物不产生不利影响，不与培养基中其他组分发生作用

具有较好的透明度;;InVitroCell.Dev.Biol.31:84-89,1995;多数植物pH要求5.0~6.2琼脂浓度7~8mg/L最高可达16mg/L较低的5mg·L-1

琼脂浓度和pH对培养基凝固程度的影响(杜永光等，2005）;PhytagelorGelrite?;不同固化剂对离体培养的影响;植物组织离体培养？

从植物体分离出符合需要的组织、器官，或细胞、原生质体等，通过无菌操作并在无菌条件下接种在培养基上进行培养以获得再生的完整植株或具有经济价值的其他产品的技术。

培养基？

供微生物、植物(包括组织细胞)或动物(包括组织细胞)生长和维持的固体或液体养料。

植物离体培养的必需元素？

大量：C、H、O、N、P、S、Ca、K、Mg

微量：Fe、Mn、Mo、Cu、Zn、B;单糖：Glucose、半乳糖(Galactose)、甘露糖(Mannose)、果糖(Fructose)、山梨糖(Sorbose)

双糖：Sucrose、乳糖(Lactose)、Maltose多糖：可溶性淀粉(Solublestarch)

PercentageofleafexplantsfrominvitroshootsofM.

‘Giganteus’withcallusandembryogeniccallus;Howtopreparemedium;Procedurefor1liter.

Addabout800ml(80%)ofdistilledwatertothe1literflask.Youneeda2literflaskfor1literofmediumtocontainboil-oversthatwilloccurduringthesterilizationprocess.

Addthecontentsofthepacket.Useadroppertosquirtsomewaterintothepackettoflushoutallofthepowder.Orthestocksolution.Swirltomixcompletelyorputonthestirrer.

Addsucroseandswirlorstirtodissolvethesu