植物组织培养操作规范.docxVIP

一、环境消毒

1.清理将接种室和超净台内不用的东西清理拿走，只留下接种需要的东西，按规矩放好。

2.紫外线灭菌20分钟或更长时间

3.75%乙醇喷雾消毒

4.熏蒸消毒（发生重大污染时用）

一、超净台的使用方法

接通电源；

先把接种需要的东西按规矩放好；

打开紫外灯照射灭菌20分钟；

关闭紫外灯，打开吹风机吹20分钟；

打开照明灯，即可进行无菌操作。

超净台内物品的标准摆放：

左边放：75%乙醇、已灭菌的培养基、无菌纸、记号笔

正中间靠后放：酒精灯、接种盘或培养皿、

右边放：无菌水、直镊、枪镊、95%乙醇、废液杯、打火机。

二、剪取外植体（叶片、茎段）

1、从品种优良、生长健壮、无病虫危害的植株上剪下当年生枝条。

2、去掉枝条上的病叶、叶柄、卷须等不需要的部分。

三、外植体的消毒技术

外植体的消毒：先用自来水或洗衣粉水冲洗3-5次，然后用75%乙醇消毒30秒—2分钟，再用0.1%升汞溶液消毒2分钟，最后在超净台内用无菌水冲洗3—5次，等待接种。