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2025年(生物技术服务)疫苗研发技术试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.2025年获批的mRNA疫苗中，用于提高脂质纳米颗粒（LNP）脾脏靶向性的关键阳离子脂质结构特征是

A.可电离头部pKa6.2±0.2，两条C18:1尾部含对称环丙烷修饰

B.可电离头部pKa7.4±0.1，两条C14:0尾部含不对称醚键

C.永久正电荷头部，三条C16:0尾部含氟化修饰

D.可电离头部pKa5.5±0.3，两条C20:1尾部含羟基化修饰

答案：A

解析：脾脏靶向需要LNP在血液pH7.4时表面电荷接近中性，进入脾脏弱酸微环境后轻微质子化，与pKa6.2脂质匹配；环丙烷提升膜曲率，促进脾脏巨噬细胞摄取。

2.在Vero细胞系中敲除干扰素受体基因IFNAR1以提升病毒产量，最可能导致的疫苗安全性风险是

A.外源因子污染概率升高

B.整合型突变激活原癌基因

C.子代病毒糖基化模式改变

D.病毒逃逸中和抗体能力增强

答案：B

解析：IFNAR1缺失使细胞丧失干扰素应答，DNA修复能力下降，逆转录病毒载体或宿主内源逆转录元件整合后更易激活下游癌基因。

3.2025年WHO推荐的“QbD+数字孪生”疫苗工艺验证框架中，关键质量属性（CQA）数字孪生模型的更新频率应

A.每批生产后离线校准一次

B.实时流式更新，延迟200ms

C.每日固定时刻批量更新

D.每季度根据市场反馈更新

答案：B

解析：数字孪生需与物理产线同步，延迟超过200ms将导致控制策略失配，无法完成实时放行（RTRT）。

4.自复制RNA（saRNA）疫苗中，插入“负链RNA病毒来源的核蛋白编码序列”主要目的是

A.增强RNA稳定性

B.提供复制酶辅因子

C.抑制宿主PKR通路

D.降低G-C含量

答案：B

解析：核蛋白与病毒RNA聚合酶形成核糖核蛋白复合体，提升saRNA复制效率，减少剂量。

5.在CHO细胞表达系统引入CRISPR/dCas9-KRAB表观抑制元件，靶向谷氨酰胺合成酶（GS）启动子，可

A.提高单克隆抗体产量

B.降低乳酸积累

C.增强糖基化均一性

D.缩短倍增时间

答案：A

解析：GS负反馈抑制解除，细胞对MSX筛选压力耐受增强，高拷贝整合克隆比例上升，抗体产量提升。

6.2025年上市的鼻喷流感疫苗采用“温度敏感型冷适应（ca）骨架+HA茎部纳米展示”，其ca位点突变主要位于

A.PB1391E→K,581E→G

B.PA256T→N,383D→G

C.NP384D→N,422E→A

D.M1218V→A,313N→D

答案：A

解析：PB1391、581位点突变降低RNA聚合酶在33℃以上活性，限制病毒在下呼吸道复制，保证安全性。

7.基于深度突变扫描（DMS）设计的泛冠状病毒疫苗，其免疫原展示形式为

A.二硫键稳定的S-2P三聚体

B.铁蛋白纳米颗粒二十面体

C.自组装蛋白纳米cage（I53-50）

D.60聚体E2p颗粒

答案：C

解析：I53-50cage可插入S蛋白受体结合域（RBD）多达60拷贝，提升抗体亲和力，且尺寸55nm利于淋巴引流。

8.在mRNA疫苗生产中，使用T7RNA聚合酶突变体Y639F+H784A，其优势是

A.降低dsRNA副产物至0.1ng/μg

B.提高加帽效率至98%

C.增强热稳定性至65℃

D.减少3’端异质性

答案：A

解析：双突变降低RNA依赖的RNA聚合酶活性，减少异常延伸，dsRNA副产物显著下降，降低先天免疫激活。

9.2025年获批的“植物瞬时表达系统”新冠疫苗，其纯化流程中采用“pH4.5沉淀+壳聚糖亲和层析”主要去除

A.宿主酚类与碱性蛋白

B.植物来源的α-1,3-岩藻糖基化糖型

C.双链RNA

D.内毒素

答案：A

解析：pH4.5使多数植物碱性蛋白及多酚沉淀，壳聚糖带正电吸附残余酚酸，防止下游层析柱污染。

10.在“人源化小鼠模型”中评估RSVpre-F疫苗，敲除FcγRIIb基因的目的是

A.增强Th1型应答

B.减少疫苗增强性疾病（VED）

C.提高中和抗体滴度

D.降低嗜酸性粒细胞浸润

答案：B

解析：FcγRIIb为抑制性受体，缺失后抗体-病毒免疫复合物无法触发异常Th2激活，减少VED肺病理。

11.2025年上市的“自组装肽水凝胶”佐剂，其触发STING通路的分子机制是

A.