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2025年(合成生物研究员)合成生物学试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.在CRISPR-Cas系统中，Cas9蛋白的主要功能是

A.识别并结合目标DNA

B.合成sgRNA

C.切割双链DNA

D.招募RNA聚合酶

答案：C

解析：Cas9蛋白在sgRNA引导下定位到目标DNA后，通过其HNH和RuvC结构域分别切割互补链与非互补链，形成双链断裂。

2.下列哪项不是合成生物学“设计-构建-测试-学习”循环中的环节

A.建模

B.标准化

C.测试

D.学习

答案：B

解析：标准化属于工程化原则，而非循环环节。

3.在酵母中构建人工合成染色体时，最常用到的筛选标记是

A.KanMX

B.URA3

C.GFP

D.lacZ

答案：B

解析：URA3为酵母营养缺陷型标记，正负筛选均可，操作便利。

4.关于“生物砖”（BioBrick）组装，下列说法正确的是

A.依赖TypeIIS限制酶

B.每次组装会留下疤痕

C.只能连接两个片段

D.不允许蛋白质融合

答案：B

解析：BioBrick使用EcoRI、XbaI、SpeI、PstI，连接后留下6bp疤痕序列，无法保证读码框连续。

5.在E.coli中引入异源MVA途径以提高萜类产量时，最先需要解决的瓶颈通常是

A.前体乙酰-CoA不足

B.氧气供应

C.糖摄取速率

D.细胞密度

答案：A

解析：MVA途径以乙酰-CoA为起始底物，胞内库容有限，常成为首要限制。

6.下列哪种技术最适合在单细胞水平高通量筛选抗生素高产菌株

A.FACS-seq

B.GC-MS

C.HPLC

D.qRT-PCR

答案：A

解析：FACS-seq结合荧光报告与细胞分选，可在10?细胞/天尺度完成定向进化。

7.在植物中实现多基因叠加时，最不易引起基因沉默的策略是

A.使用同一启动子驱动所有基因

B.采用核基质附着区（MAR）

C.高频使用CaMV35S增强子

D.随机整合

答案：B

解析：MAR可形成独立染色质结构域，降低位置效应与沉默概率。

8.关于无细胞蛋白合成系统（CFPS），下列说法错误的是

A.可加入非天然氨基酸

B.需要保持氧化环境以形成二硫键

C.产物可直接用于质谱分析

D.必须添加T7RNA聚合酶

答案：D

解析：原核CFPS常用T7系统，但真核提取物依赖内源聚合酶，T7非必需。

9.在动态代谢控制中，使用“核糖开关”主要调控

A.转录延伸

B.翻译起始

C.mRNA剪接

D.蛋白质降解

答案：B

解析：配体结合改变RNA构象，暴露或遮蔽RBS，从而调控翻译起始。

10.当利用CRISPRi抑制靶基因时，dCas9与哪种蛋白融合可进一步增强抑制效果

A.RNaseH

B.Methyltransferase

C.ωsubunitofRNAP

D.FokI

答案：C

解析：dCas9-ω招募RNA聚合酶，物理阻碍转录起始，抑制效率提升3–10倍。

二、不定项选择题（每题3分，共15分，多选少选均不得分）

11.以下哪些属于“最小基因组”必需基因类别

A.核糖体蛋白

B.DNA聚合酶III亚基

C.组蛋白

D.脂肪酸合成酶

答案：A、B

解析：支原体等原核最小基因组不含组蛋白；脂肪酸合成非绝对必需，可外源供给。

12.在哺乳动物细胞中构建人工正交信号通路时，可采用的策略包括

A.使用植物激素受体

B.引入细菌磷酸转移系统

C.设计合成配体-诱导型降解标签

D.采用CRISPRa系统

答案：A、C、D

解析：细菌磷酸转移系统依赖原特异蛋白，哺乳动物缺乏对应底物，难以直接移植。

13.下列哪些方法可用于提高CRISPR-Cas碱基编辑器纯度（减少脱靶）

A.使用高保真Cas变体

B.缩短sgRNA长度至17nt

C.加入双切sgRNA

D.利用瞬时表达系统

答案：A、B、D

解析：双切sgRNA用于Cas12a，不适用于单链切口碱基编辑器。

14.关于“细胞群体感应”在合成生物学中的应用，正确的是

A.可降低代谢负担

B.可实现同步裂解

C.必须依赖AHL信号

D.可用于生物被膜图案化

答案：A、B、D

解析：群体感应信号除AHL外，还有AI-2、寡肽等。

15.在自动化生物铸造厂（BioFoun